PCR—微孔板杂交检测端粒酶活性方法的建立及初步应用

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目的建立聚合酶链反应-微孔板杂交法检测端粒酶活性的方法及应用于临床。方法利用Kim法处理样品及扩增端粒酶产物,引物TS标记生物素,扩增产物与包被有亲合素的微孔板结合,并与标记地高辛特异探针杂交;与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体反应,经PNPP显色。结果该方法最佳实验条件为探针浓度2.5 μmol/L,杂交时间1 h,批内变异系数为9.5%,批间变异系数为16.5%。在29例各种恶性肿瘤组织,端粒酶活性总检出率为89.6%,而在17例炎性包块与良性增生组织为11.8%,7例正常组织中未发现有端粒酶活性。结论该
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