【摘 要】
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背景：破骨细胞过度活化是骨质疏松症发生、发展过程中的关键环节，探究破骨细胞功能、开发具有抑制破骨细胞分化减少骨重吸收的药物，是当前探索骨质疏松症临床治疗的重要手段。目的：基于MAPK/NF-κB信号通路，分析帕罗西汀影响破骨细胞分化的作用机制。方法：（1）体外实验：采用CCK-8实验检测不同浓度帕罗西汀对小鼠骨髓源性巨噬细胞增殖的影响。在巨噬细胞集落刺激因子和核因子κB受体活化因子配体的诱导下，使
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81860402）,项目负责人：宗少晖； 广西医学高层次骨干人才培养“139”计划（桂卫科教发[2020]15号）,项目负责人：宗少晖；
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背景：破骨细胞过度活化是骨质疏松症发生、发展过程中的关键环节，探究破骨细胞功能、开发具有抑制破骨细胞分化减少骨重吸收的药物，是当前探索骨质疏松症临床治疗的重要手段。目的：基于MAPK/NF-κB信号通路，分析帕罗西汀影响破骨细胞分化的作用机制。方法：（1）体外实验：采用CCK-8实验检测不同浓度帕罗西汀对小鼠骨髓源性巨噬细胞增殖的影响。在巨噬细胞集落刺激因子和核因子κB受体活化因子配体的诱导下，使用不同浓度帕罗西汀干预破骨细胞分化，抗酒石酸酸性磷酸酶染色确定破骨细胞数目；RT-qPCR检测帕罗西汀对破骨细胞分化相关细胞因子mRNA表达的影响；Western Blot检测帕罗西汀对小鼠骨髓源性巨噬细胞中核因子κB、MAPK信号通路及破骨细胞相关蛋白表达的影响。（2）体内实验：将40只C57BL/6小鼠按随机数字表分为空白对照组、脂多糖组、帕罗西汀2 mg/kg,5 mg/kg组，每组10只。脂多糖组、帕罗西汀2 mg/kg,5 mg/kg组每2 d颅骨矢状缝皮下注射脂多糖（构建小鼠颅骨骨溶解模型），帕罗西汀两组每次皮下注射脂多糖1 d后注射对应剂量的帕罗西汀，14 d后，分离颅骨进行Micro-CT扫描分析。结果与结论：（1）体外实验：当帕罗西汀浓度≤5μmol/L时对小鼠骨髓源性巨噬细胞的增殖无影响，浓度大于10μmol/L时抑制细胞的增殖；当帕罗西汀浓度≥0.5μmol/L时，可明显抑制破骨细胞分化的数量及形态，抑制破骨细胞分化c-Fos、Nfatc1、Ctsk、Mmp9、Acp5、Atp6v0d2的mRNA表达水平；0.5μmol/L的帕罗西汀可通过抑制核因子κB、MAPK信号通路的激活，进而抑制破骨细胞相关蛋白c-Fos、Nfatc1、Ctsk的表达；（2）体内实验：Micro-CT扫描分析结果显示，与脂多糖组比较，帕罗西汀5 mg/kg组可以有效提高骨小梁数量、骨体积分数（P ＜0.05），降低骨表面积骨体积比、骨小梁分离度（P ＜0.05）；（3）结果表明，帕罗西汀可以通过抑制破骨细胞分化减少骨的重吸收，具有潜在的治疗骨质疏松症作用。
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