观察糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓自噬功能的变化及其在神经病理性疼痛中的作用。
方法成年健康雄性SPF级SD大鼠44只，随机分为正常对照组(N组，8只)和糖尿病组(36只)。糖尿病组大鼠腹腔单次注射链脲佐菌素60 mg/kg建立模型。造模4周时，机械缩足阈值(MWT)较基础值下降>50%定为糖尿病神经病理性疼痛(DNP)大鼠，再随机分为3组，神经病理性疼痛组(DP组)，神经病理性疼痛＋雷帕霉素组(DR组)，神经病理性疼痛＋三甲基嘌呤(3－MA)组(DA组)，每组8只。DR组在DNP造模成功后腹腔注射雷帕霉素1 mg/kg，1次/d，连续注射14 d；DA组在同时间点腹腔注射3－MA 2 mg/kg；DP组和N组大鼠在同时间点腹腔注射等容量磷酸盐缓冲液(PBS)。利用von Frey纤维丝测定大鼠MWT值，采用蛋白免疫印迹法测定大鼠脊髓自噬相关蛋白LC3－Ⅱ，Beclin－1，P62的表达水平。
结果DR组大鼠给药后第3﹑5﹑7﹑9﹑14天MWT较给药前降低[(4.8±0.8)﹑(4.3±0.7)﹑(4.1±0.6)﹑(3.6±0.5)﹑(3.3±0.6)g比(5.3±0.9)g，均P<0.05]；DA组从给药后第5﹑7﹑9﹑14天MWT升高[(7.0±0.8)﹑(7.7±1.0)﹑(9.1±0.9)﹑(9.6±1.1)g比(5.3±0.6)g，均P<0.05]。与DP组相比，DR组大鼠脊髓LC3－Ⅱ(1.32±0.12比1.02±0.11，P<0.05)和Beclin－1蛋白(1.03±0.08比0.80±0.06，P<0.05)表达升高，P62蛋白表达降低(0.21±0.05比0.47±0.06，P<0.05)；DA组大鼠脊髓LC3－Ⅱ(0.70±0.09比1.02±0.11，P<0.05)和Beclin－1(0.55±0.05比0.80±0.06，P<0.05)蛋白表达降低，P62蛋白表达升高(0.71±0.06比0.47±0.06 P<0.05)。
结论脊髓自噬功能的激活参与大鼠糖尿病神经病理性疼痛的维持。