【摘 要】
：
通过合理应用Red/ET重组技术实现基因打靶载体的快速构建。在Red/ET重组介导下,首先从基因组DNA中将靶基因片段亚克隆至打靶质粒载体中,随后将两端带有50 bp同源臂的抗性筛选
【机 构】
：
第三军医大学军事预防医学院全军复合伤研究所、创伤烧伤复合伤国家重点实验室,基因桥研究室
【基金项目】
：
第三军医大学留学回国人员启动基金项目资助~~
论文部分内容阅读
通过合理应用Red/ET重组技术实现基因打靶载体的快速构建。在Red/ET重组介导下,首先从基因组DNA中将靶基因片段亚克隆至打靶质粒载体中,随后将两端带有50 bp同源臂的抗性筛选基因插入并替换靶基因上的目标序列,如此两步操作即可完成一个传统型基因敲除打靶载体的构建;结合Cre-loxP系统,在传统型基因敲除打靶载体的基础上,经过再一轮的Red/ET重组就能够成功实现条件性基因敲除打靶载体的构建。整个实验过程不需要PCR扩增长、短臂序列,也不涉及酶切、连接反应,因此,不仅省时、省力,而且所构建的基因打靶载体序列准确,无突变。实验方法的建立为加速后基因组时代的基因功能研究提供了一条捷径。
其他文献
<正>一、"语文教学内容"是个什么问题?语文教育研究,有一些旁人看起来很奇怪的论题:比如"语文的性质是什么?""语文是什么?""语文课究竟是干什么的?""不能把语文课上成政治课!
<正>【教学缘起】时下,"模板作文""套话作文""八股作文"正受到批判。大家都清醒地意识到:随着应试教育的愈演愈烈,中学的一些作文课堂已经失去了它本真、自然的状态。
颜元是明末清初的一位重要的思想家。他反对读死书，空谈性理，静坐冥想；提倡实学，注重实践，是明末清初实学思潮的代表人物。颜元较同时期的其他学者更显示出批判的彻底性，批判的触角
简要介绍了山西省农业产业化发展现状,并在探讨农业产业化经营模式选择的基础上,提出了推进山西省农业产业化经营进程的对策和措施。
课程资源是保证课程实施的基本条件,但长期以来,公共教育学课程资源在开发利用方面存在着教学时空封闭、教学手段单一、师范精神缺失的弊端。树立可用资源的丰富性、作用发挥
普通高等学校毕业生是我国宝贵的人力资源。当前,随着我国社会主义市场经济体制的建立和完善,国际化、信息化的逐步推进,我国高等教育事业的飞速发展,我国高等院校连年扩大招
随着教育改革的不断推进,小组合作学习近几年在我国的小学数学教学中已经成为重要的教学组织形式之一。但人们在运用这种形式的过程中仍存在一些问题,如“小组活动重视形式,
1概述随着光通信技术的发展,更大容量、远距离传输的光通信设备已经突破重重限制,崭露头角.外调制技术无论从理论上还是实验上都可以大大改善光传输信号的性能,大大促进了光
<正>语文教学存在的最大问题是"该教的没有教,不该教的乱教",这就是所谓"语文教学内容问题"。怎么解决这个问题呢?理想的做法是,由