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目的 探讨微RNA（miR）-133a-3p靶向调控转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad3对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法 选择2020年2月至2021年2月焦作市人民医院皮肤科收治的瘢痕疙瘩患者29例为研究对象，手术切取瘢痕疙瘩组织及其周围正常皮肤组织，分离培养瘢痕疙瘩成纤维细胞（KF）和正常皮肤组织成纤维细胞（NF）。取对数生长期KF细胞，随机分为空白对照组、miR-阴性对照（NC）组、miR-133a-3p组、miR-133a-3p+pcDNA3.1组、miR-133a-3p+pcDNA3.1-TGF-β1组；空白对照组细胞不做任何转染，miR-NC组细胞转染miR-NC,miR-133a-3p组细胞转染miR-133a-3p mimic, miR-133a-3p+pcDNA3.1组细胞共转染miR-133a-3p mimic和pcDNA3.1,miR-133a-3p+pcDNA3.1-TGF-β1组细胞共转染miR-133a-3p mimic和pcDNA3.1-TGF-β1。实时荧光定量聚合酶链反应法检测组织和细胞中miR-133a-3p和Ⅰ型胶原蛋白（collagenⅠ）、Ⅲ型胶原蛋白（collagenⅢ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）mRNA的表达，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖活力，流式细胞术检测细胞凋亡情况。应用TargetScan数据库通过生物信息分析预测miR-133a-3p与TGF-β1的3′非翻译区（3′-UTR）存在结合位点，构建含有预测结合位点的野生型（Wt）和突变型（Mt）TGF-β1 3′-UTR片段的荧光素酶报告基因载体，分别将用脂质体2000包裹的Wt TGF-β1或Mt TGF-β1报告基因载体与miR-133a-3p mimics或miR-NC共转染入KF细胞，将转染后的细胞设为miR-NC+Wt TGF-β1组、miR-133a-3p+Wt TGF-β1组、miR-NC+Mt TGF-β1组、miR-133a-3p+Mt TGF-β1组，双荧光素酶检测试剂盒检测4组细胞双荧光素酶活性。Western blot检测空白对照组、miR-NC组、miR-133a-3p组KF细胞中TGF-β1、Smad3蛋白的相对表达量。结果 瘢痕疙瘩组织中miR-133a-3p相对表达量显著低于正常皮肤组织（t=18.988,P＜0.05）。KF细胞中miR-133a-3p相对表达量显著低于NF细胞（t=18.679,P＜0.05）。miR-133a-3p组细胞中miR-133a-3p相对表达量显著高于空白对照组和miR-NC组，CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA mRNA相对表达量显著低于空白对照组和miR-NC组（P＜0.05）;空白对照组与miR-NC组细胞中miR-133a-3p和CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA mRNA相对表达量比较差异无统计学意义（P＞0.05）。miR-133a-3p组细胞凋亡率显著高于空白对照组和miR-NC组，细胞增殖活力显著低于空白对照组和miR-NC组（t=13.912、14.227、-8.020、-6.947,P＜0.05）;空白对照组与miR-NC组细胞凋亡率、细胞增殖活力比较差异无统计学意义（t=-0.607、0.448,P＞0.05）。miR-133a-3p+Wt TGF-β1组细胞相对荧光素酶活性显著低于miR-NC+Wt TGF-β1组、miR-NC+Mt TGF-β1组、miR-133a-3p+Mt TGF-β1组（t=-15.729、-19.490、-16.186,P＜0.05）。miR-NC+Wt TGF-β1组、miR-NC+Mt TGF-β1组、miR-133a-3p+Mt TGF-β1组细胞相对荧光素酶活性两两比较差异均无统计学意义（t=-0.596、0.847、0.842,P＞0.05）。KF细胞中Smad3和TGF-β1蛋白相对表达量显著高于NF细胞（t=5.758、9.027,P＜0.05）。miR-133a-3p组细胞中Smad3和TGF-β1蛋白相对表达量显著高于miR-NC组（t=-4.913、-8.314,P＜0.05）。miR-133a-3p+pcDNA3.1-TGF-β1组细胞中CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA mRNA相对表达量和细胞增殖活力显著高于miR-133a-3p组和miR-133a-3p+pcDNA3.1组，细胞凋亡率显著低于miR-133a-3p转染组和miR-133a-3p+pcDNA3.1组（P＜0.05）。miR-133a-3p组与miR-133a-3p+pcDNA3.1组细胞中CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA mRNA相对表达量及细胞凋亡率和细胞增殖活力比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 过表达miR-133a-3p可通过负调控TGF-β1抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖，促进细胞凋亡，提示miR-133a-3p/TGF-β1通路可能是瘢痕疙瘩治疗的一个新的靶点。