血浆中6种初级胆汁酸HPLC-MS/MS测定

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目的建立高效液相色谱-串联质谱法快速检测血浆中6种初级胆汁酸的含量。方法血浆经甲醇沉淀蛋白后,用Thermo Accucore C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.6μm)进行色谱分离,流动相为甲醇-水(0.1%甲酸+5 mmol/L乙酸铵),梯度洗脱。负离子模式下多反应监测模式检测。实测6名健康成年人和6只成年SD大鼠样本。结果6种初级胆汁酸在6 min内实现基线分离,在5~2 000μg/L范围内线性良好,相关系数> 0.995,检出限为0.25~0.45μg/L,定量限为0.84~1.49μg/L。日内、日间加标回收率分别为86.3%~111.5%和87.7%~104.9%;日内、日间相对标准偏差分别为5.2%~11.9%和6.6%~14.3%。健康成年人和成年SD大鼠血浆中初级胆汁酸的浓度显著不同。结论该方法简单、快速、灵敏、准确,可用于临床检验和动物试验中初级胆汁酸的快速检测。
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