【摘 要】
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目的探讨B7-H3分子对肾透明细胞癌细胞系786-O转移的影响。方法慢病毒感染法构建B7-H3低表达稳转细胞系(shB7-H3)和阴性对照组(shNC)。RT-qPCR、流式细胞术及Western blot试验验证慢病毒转染效率；CCK-8法检测shNC组和shB7-H3组786-O细胞增殖差异；流式细胞术检测两组细胞周期变化；细胞划痕和Transwell试验测定两组细胞迁移和侵袭能力差异；Wes
【机 构】
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苏州大学医学部 215000,苏州大学附属第一医院，江苏省临床免疫学重点实验室 215000,苏州大学医学部 215000,苏州大学医学部 215000,苏州大学附属第一医院，江苏省临床免疫学重点实验
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目的探讨B7-H3分子对肾透明细胞癌细胞系786-O转移的影响。
方法慢病毒感染法构建B7-H3低表达稳转细胞系(shB7-H3)和阴性对照组(shNC)。RT-qPCR、流式细胞术及Western blot试验验证慢病毒转染效率；CCK-8法检测shNC组和shB7-H3组786-O细胞增殖差异；流式细胞术检测两组细胞周期变化；细胞划痕和Transwell试验测定两组细胞迁移和侵袭能力差异；Western blot试验检测上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)相关标志蛋白表达变化；流式细胞术和RT-qPCR检测两组细胞趋化因子及其受体表达变化；Transwell试验检测抗CCL4阻断性抗体对细胞迁移和侵袭能力的影响。
结果流式细胞术检测发现人肾透明细胞癌细胞系786-O高表达B7-H3分子，慢病毒转染法成功构建B7-H3低表达细胞株(786-O-shB7-H3)和对照组细胞株(786-O-shNC)。B7-H3分子对786-O细胞增殖活性没有明显影响，shB7-H3和shNC两组细胞周期差异无统计学意义。与shNC组比较，shB7-H3组细胞迁移和侵袭能力降低，EMT相关标志蛋白(纤维连接蛋白和N-cadherin)表达水平降低，E-cadherin表达水平升高。shB7-H3组细胞中趋化因子CCL4及其受体CCR5表达低于shNC组，加入抗CCL4抗体阻断剂后shNC组细胞迁移和侵袭能力降低，而shB7-H3组无明显变化。
结论敲低B7-H3分子表达对786-O细胞的增殖水平无明显影响，但可以影响786-O细胞的EMT进程，降低肿瘤迁移和侵袭能力，从而抑制肿瘤进展。
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