【摘 要】
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目的 建立驼乳中布鲁氏菌的实时荧光PCR快速检测方法.方法 根据布鲁氏菌外膜蛋白omp10基因的碱基序列,设计引物探针,从模拟布鲁氏菌污染的驼乳中提取布鲁氏菌DNA片段进行实时
【机 构】
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新疆医科大学公共卫生学院, 乌鲁木齐 830001;新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心, 乌鲁木齐 830011
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目的 建立驼乳中布鲁氏菌的实时荧光PCR快速检测方法.方法 根据布鲁氏菌外膜蛋白omp10基因的碱基序列,设计引物探针,从模拟布鲁氏菌污染的驼乳中提取布鲁氏菌DNA片段进行实时荧光PCR扩增检测.结果 该方法从布鲁氏菌M5株中扩增出了特异性目的片段omp10,而对大肠埃希式杆菌等细菌的扩增结果均为阴性.经过10倍倍比稀释的模板进行检测,该方法的灵敏度为最低可检出2.31×10?4 ng/μL的DNA.标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好线性关系,相关系数为0.9928,扩增效率E=0.97.结论 建立的实时荧光PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高的优点,为驼乳中布鲁氏菌病的早期预防及流行病学监测提供了有效的技术手段.
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