【摘 要】
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背景与目的：笔者前期研究发现，长链非编码RNA Fox P4-AS1 （lnc RNA Fox P4-AS1）在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中异常表达，其低表达是PTC区域淋巴结转移的独立危险因素，但其功能及作用机制尚不清楚。因此，本研究探讨lnc RNA Fox P4-AS1在PTC细胞中的表达，初步分析其对PTC细胞生物学行为的影响。方法：用q RT-PCR检测PTC细胞系（TPC-1、K1细
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（81860478）；
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背景与目的：笔者前期研究发现，长链非编码RNA Fox P4-AS1 （lnc RNA Fox P4-AS1）在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中异常表达，其低表达是PTC区域淋巴结转移的独立危险因素，但其功能及作用机制尚不清楚。因此，本研究探讨lnc RNA Fox P4-AS1在PTC细胞中的表达，初步分析其对PTC细胞生物学行为的影响。方法：用q RT-PCR检测PTC细胞系（TPC-1、K1细胞）和正常甲状腺滤泡上皮细胞（Nthy-ori3-1细胞）中lnc RNA Fox P4-AS1的表达；将TPC-1、K1细胞分别转染Fox P4-AS1过表达慢病毒载体和空载病毒载体（阴性对照）后，并分别用CCK-8实验、克隆形成实验、Ed U、Transwell实验、流式细胞术分析细胞生物学功能的变化；通过GEPIA数据库和Lnc Tar网站预测Fox P4-AS1的靶基因，并用Western blot进行验证。用以上转染后的细胞构建小鼠皮下移植瘤模型，观察移植瘤的生长情况，免疫组化检测瘤组织Ki-67的表达。通过KEGG数据库初步分析Fox P4-AS1可能影响的信号通路。结果：q RT-PCR结果显示，与正常甲状腺滤泡上皮细胞比较，lnc RNA Fox P4-AS1在两种PTC细胞中的表达水平均明显降低（均P＜0.05）。细胞功能实验显示，转染Fox P4-AS1过表达慢病毒载体的TPC-1、K1细胞增殖活力明显减弱、侵袭和迁移能力均较阴性对照组细胞明显降低，且细胞周期阻滞在G0/G1期（均P＜0.01）。GEPIA数据库和Lnc Tar网站预测Fox P4-AS1与CDK4存在潜在的相互作用靶点，Western blot结果显示，转染Fox P4-AS1过表达慢病毒载体两种细胞的CDK4/cyclin D1表达水平较各自阴性对照组细胞明显降低（均P＜0.05）。皮下移植瘤实验结果显示，转染Fox P4-AS1过表达慢病毒载体的PTC细胞较转染空载病毒载体的PTC细胞在小鼠体内生长慢，形成的瘤体小，且瘤组织中Ki-67表达减少。KEGG通路富集分析显示，Fox P4-AS1低表达主要富集于PI3K-Akt-m TOR通路、细胞周期、细胞凋亡、免疫调节相互作用，Fox P4-AS1高表达主要富集于DNA甲基化、氧化应激通路等。结论：lnc RNA Fox P4-AS1在PTC细胞中表达下调，且与PTC细胞的恶性生物学行为密切相关，Fox P4-AS1可能通过抑制CDK4/cyclin D1表达抑制PTC细胞增殖，作为保护性因素发挥作用。
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