【摘 要】
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目的 建立一种可同时检测无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）、嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）、霍乱弧菌（Vibrio cholerae）、大肠杆菌（Escherichia coli）和沙门菌（Salmonella） 5种罗非鱼常见食源性致病菌的多重聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）方法。方法 根据5种致病
【基金项目】
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国家重点研发计划项目（2019YFC1605400）～～；
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目的 建立一种可同时检测无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）、嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）、霍乱弧菌（Vibrio cholerae）、大肠杆菌（Escherichia coli）和沙门菌（Salmonella） 5种罗非鱼常见食源性致病菌的多重聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）方法。方法 根据5种致病菌特异性基因片段设计并合成引物,优化多重PCR体系条件,并对多重PCR体系的特异性、灵敏度以及人工模拟样品进行检测。结果 建立的多重PCR方法可同时扩增5种目的菌株的特异性条带,且不与非靶标细菌发生交叉反应。敏感性实验结果显示,该方法对无乳链球菌、嗜水气单胞菌、沙门菌、霍乱弧菌、大肠杆菌纯培养物基因组DNA的检出限均为0.4 ng/μL。人工模拟样品检测结果显示,该方法可以快速且准确地检测上述5种食源性致病菌,且检出限可达到2×10~1 CFU/g。结论 本研究建立了一种可同时检测无乳链球菌、嗜水气单胞菌、霍乱弧菌、大肠杆菌和沙门菌5种罗非鱼常见食源性致病菌的多重PCR检测方法。该方法的建立为罗非鱼常见食源性致病菌的快速检测提供了重要的技术手段。
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