【摘 要】
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以酿酒酵母基因组为模板,采用PCR扩增出编码成熟5-氨基酮戊酸合酶（第一个氨基酸残基为Asn63）的基因hem1,将其克隆到pMAL-2x中构建重组表达载体,转化大肠杆菌表达菌株BL21（DE3）,在
【基金项目】
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安徽省科技攻关项目（06013155C）资助.
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以酿酒酵母基因组为模板,采用PCR扩增出编码成熟5-氨基酮戊酸合酶（第一个氨基酸残基为Asn63）的基因hem1,将其克隆到pMAL-2x中构建重组表达载体,转化大肠杆菌表达菌株BL21（DE3）,在0.5 mmol·L^-1的IPTG诱导下,SDS-PAGE显示分子量约为49 kD的特异条带.重组菌在紫外灯下显示红色荧光,表明酶在大肠杆菌体内活性表达.体外反应表明,在浓度超过0.1 mmol·L^-1的IPTG诱导下,酶活力下降,培养基的初始pH值约为6.5,5-氨基酮戊酸产量达最大
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