【摘 要】
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采用套式PCR和荧光实时定量PCR两种方法检测食品中花生主要过敏原Ara h1基因成分,从而推断食品中是否含有花生过敏原成分.根据GenBank提供的花生主要过敏原基因Ara h1 DNA序
【机 构】
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呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室
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采用套式PCR和荧光实时定量PCR两种方法检测食品中花生主要过敏原Ara h1基因成分,从而推断食品中是否含有花生过敏原成分.根据GenBank提供的花生主要过敏原基因Ara h1 DNA序列(登录号为AF432231)的中一段序列分别设计2对内外特异性引物,扩增目的基因片段来建立套式PCR方法；再用上述内引物扩增目的片段,建立SYBRGreen Ⅰ荧光实时定量PCR方法,绘出拷贝数-CT标准曲线；并通过这2种PCR方法检测8种食品中含有花生主要过敏原Ara h1基因成分.套式PCR方法具有较高的特异性和灵敏度,SYBR Green Ⅰ荧光实时定量PCR方法的标准曲线在3×102至3× 108 copies范围内线性关系良好,R2值为0.993 5,检测低限设定为3× 103 copies.2种方法检测8种食品样品,结果均与食物过敏原标注内容相符.本研究建立的2种方法具有快速、灵敏等优点,可用于食品中花生主要过敏原基因Ara h1成分的检测.
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