通过观察顺铂对人骨肉瘤SaOS-2细胞核苷酸结合寡聚域1(NOD1)和NOD2表达的影响,探讨顺铂治疗骨肉瘤的作用机制。
方法SaOS-2细胞加入顺铂,浓度依次为0 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L,命名为S0组、S5组、S10组、S20组,培养24 h、48 h、72 h,分别采用CCK8法、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法和免疫荧光法测定细胞生长活率、NOD1和NOD2的表达。
结果在细胞培养48 h、72 h,S5组细胞存活率显著低于S0组(65.53%比100.00%;46.43%比100.00%,χ2=8.64、73.97,均P<0.01)。在细胞培养24 h、48 h、72 h,S10组、S20组细胞存活率显著低于S0组(80.60%比100.00%、42.94%比100.00%、27.90%比100.00%;62.54%比100.00%、33.09%比100.00%、22.95%比100.00%,χ2=20.99、79.72、112.50;45.40、67.56、125.20,均P<0.01),且S20组骨肉瘤细胞存活率显著低于S5组(62.54%比93.78%、33.09%比65.53%、22.95%比46.43%,χ2=28.47、21.78、11.71,均P<0.01)。S5组NOD1和NOD2 mRNA的表达量在骨肉瘤细胞培养48 h、72 h显著高于培养24 h且高于S0组[(3.64±0.44)比(4.47±1.22)比(1.79±0.44)比(1.00±0.00);(6.88±2.79)比(6.86±2.40)比(2.29±0.70)比(1.00±0.00),F=29.12、24.11,均P<0.01]。顺铂作用细胞48 h和72 h,NOD1蛋白表达较S0组有升高趋势。NOD1和NOD2 mRNA的表达量呈现显著直线正相关(n=36,r=0.92,P<0.01)。
结论顺铂对骨肉瘤细胞的功能有提升作用,呈现时间、浓度依赖性,顺铂可能是治疗骨肉瘤有效的药物,其机制可能是通过NOD1和NOD2途径。