【摘 要】
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石斛生物碱(Dendrobium nobile Lindl.alkaloids,DNLA)可促进乳腺癌和结肠癌细胞凋亡,但其是否影响宫颈癌细胞的恶性生物学行为还未知.该文探究了 DNLA对宫颈癌SiHa细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及可能机制.将不同剂量(15、30、60 ng/mL)DNLA作用于SiHa细胞,转染 si-NC、si-KCNQ1OT1、miR-NC、miR-487a-3p mimics、pcDNA-NC 或 pcDNA-KCNQ1OT1 至 SiHa 细胞,或60 ng/mL DNL
【机 构】
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上海市第七人民医院妇科,上海200137
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石斛生物碱(Dendrobium nobile Lindl.alkaloids,DNLA)可促进乳腺癌和结肠癌细胞凋亡,但其是否影响宫颈癌细胞的恶性生物学行为还未知.该文探究了 DNLA对宫颈癌SiHa细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及可能机制.将不同剂量(15、30、60 ng/mL)DNLA作用于SiHa细胞,转染 si-NC、si-KCNQ1OT1、miR-NC、miR-487a-3p mimics、pcDNA-NC 或 pcDNA-KCNQ1OT1 至 SiHa 细胞,或60 ng/mL DNLA作用于转染pcDNA-NC或pcDNA-KCNQ1OT1的SiHa细胞后,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测细胞中MMP2、MMP9、切割胱天蛋白酶3基因在蛋白质水平的表达量,RT-qPCR检测KCNQ1OT1和miR-487a-3p表达.双荧光素酶报告基因实验验证KCNQ1OT1和miR-487a-3p调控关系.结果表明,不同剂量(15、30、60 ng/mL)DNLA可降低SiHa细胞吸光度值、迁移数、侵袭数、MMP2和MMP9基因在蛋白质水平的表达量及KCNQ1OT1表达,而提高细胞凋亡率、切割胱天蛋白酶3基因在蛋白质水平的表达及miR-487a-3p表达(P＜0.05).低表达KCNQ1OT1或高表达miR-487a-3p均可降低SiHa细胞吸光度值、迁移数、侵袭数及MMP2和MMP9基因在蛋白质水平的表达量(P＜0.05),而提高细胞凋亡率和切割胱天蛋白酶3基因在蛋白质水平的表达量(P＜0.05).KCNQ1OT1靶向负调控miR-487a-3p的表达.高表达KCNQ1OT1对SiHa细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响与低表达KCNQ1OT1相反,且高表达KCNQ1OT1降低了 60 ng/mL DNLA对SiHa细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响.综上所述,DNLA可能通过调控KCNQ1OT1/miR-487a-3p轴降低宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进SiHa细胞凋亡.
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