苦参碱抑制宫颈癌HeLa细胞增殖机制的探讨

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目的:研究苦参碱(Mat)对人体外培养的宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能的分子机制及信号传导通路。方法:分别以不同浓度(0.5、1.0、1.5、2.0g/L)的苦参碱处理体外培养的HeLa细胞,于24h、48h、72h后应用MTT法检测细胞增殖抑制率;于48h后应用Western Blot方法检测细胞中eIF4E、4E-BP1、mTOR和ERK蛋白表达情况。1.0g/L的苦参碱作用HeLa细胞1h、3h、6h、12h后,Western Blot方法测其eIF4E、4E-BP1、mTOR、ERK蛋白的磷酸化水平。结果:(1)苦参碱可明显抑制体外培养的人宫颈癌HeLa细胞的增殖,且呈时间和剂量依赖性:在相同的作用时间内,随着苦参碱浓度的增加,HeLa细胞的增殖抑制率明显升高,差别有统计学意义(F=235.04,P<0.01);在同一苦参碱作用浓度时,随着苦参碱作用时间的延长,HeLa细胞的增殖抑制率也明显升高,差别有显著性(F=320.21,P<0.01)。(2)Mat浓度和作用时间对HeLa细胞增殖抑制率的影响有交互作用(F=5.22,P<0.01),2.0g/L苦参碱作用HeLa细胞72后,对其增殖抑制率达到高峰(增殖抑制率为65.30±2.17,P<0.05)。(3)不同浓度苦参碱处理HeLa细胞48h后,eIF4E、4E-BP1、mTOR和ERK蛋白的表达均无明显变化,差别无显著性(F=0.17、0.93、0.11、0.20,P>0.05)。(4)1.0g/L苦参碱作用于HeLa细胞不同时间后,细胞中eIF4E、4E-BP1、ERK蛋白磷酸化水平降低,且呈时间依赖性(F=43.48、107.23、143.27,P<0.05),但是mnTOR磷酸化水平较对照组无明显变化(F=0.49,P>0.05)。结论:苦参碱可以明显抑制体外培养子宫颈癌HeLa细胞的增殖,具有时间剂量依赖性,其机制可能是通过MAPK信号通路抑制eIF4E以及4E-BP1的磷酸化而发挥作用。
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