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目的
研究从胚胎肢芽内提取和纯化具有神经营养活性的物质。
方法剖腹取胚龄为10~15天的SD大鼠胚胎,将其肢芽连同基部剪下、剪碎。匀浆离心后取上清液超滤,分别收集大于10 000 KD的组分和小于10 000 KD的组分。然后将大于10 000 KD的组分用高速蛋白液相层析系统分离,得5个蛋白组分,即>300 000 KD、210 000 KD、95 000 KD、34 000 KD和22 000 KD组分。再将这5个组分连同小于10 000 KD的组分,分别加至胚鼠背根神经节感觉神经元的培养基中,培养24小时后用MTT法测定神经元的活性。
结果95 000 KD、34 000 KD和22 000 KD 3个组分对神经元有营养活性。其中22 000 KD的活性较弱,95 000 KD和34 000 KD的活性较强。此外,22 000 KD、34 000 KD和95 000 KD合在一起的活性明显强于任何单一组分。
结论胚胎肢芽内含有较强的促进神经元活性的神经营养活性物质,为神经营养因子提供了新的来源。