【摘 要】
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为获得草铵膦完全抑制蛹虫草生长的最小浓度和一种快速构建Bar基因双元载体的方法,本文首先采用浓度梯度法研究草铵膦对蛹虫草的抑制效果,其次采用双接头PCR(DJ-PCR)构建Bar基因表达盒,然后分别采用T4 DNA连接酶法和同源重组法把Bar基因表达盒插入双元载体pAg1-H3的T-DNA区域,以构建Bar基因双元载体pAg-Bar,并比较T4 DNA连接酶法和同源重组法的连接效果,最后通过农杆菌介导转化法来验证载体pAg-Bar的有效性及Bar基因在蛹虫草中的功能.结果表明:草铵膦完全抑制蛹虫草分生孢子
【机 构】
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河南工业大学粮油食品学院 郑州 450001;华南农业大学食品学院 广州 510642;华南农业大学食品学院 广州 510642;河南工业大学粮油食品学院 郑州 450001
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为获得草铵膦完全抑制蛹虫草生长的最小浓度和一种快速构建Bar基因双元载体的方法,本文首先采用浓度梯度法研究草铵膦对蛹虫草的抑制效果,其次采用双接头PCR(DJ-PCR)构建Bar基因表达盒,然后分别采用T4 DNA连接酶法和同源重组法把Bar基因表达盒插入双元载体pAg1-H3的T-DNA区域,以构建Bar基因双元载体pAg-Bar,并比较T4 DNA连接酶法和同源重组法的连接效果,最后通过农杆菌介导转化法来验证载体pAg-Bar的有效性及Bar基因在蛹虫草中的功能.结果表明:草铵膦完全抑制蛹虫草分生孢子生长的最小质量浓度为400μg/mL;采用DJ-PCR方法可快速构建Bar基因表达盒;采用T4 DNA连接酶法和同源重组法均可实现双元载体pAg-Bar的构建,而同源重组法更快速、高效;采用农杆菌介导转化法可把双元载体pAg-Bar中的Bar基因表达盒整合入蛹虫草的基因组,使蛹虫草转化子具有草铵膦抗性.本研究建立的载体构建方法具有快速、高效的特点,适用于抗性基因载体、敲除载体、超表达载体等载体的构建,为蛹虫草基因功能的鉴定提供技术支撑.
其他文献
采用热裂解气质联用(Py?GC/MS)方法鉴别聚酰胺56(PA56)、聚酰胺66(PA66)和聚酰胺6(PA6)及其共混物.结果表明,在550℃裂解温度下,PA56与PA66相对丰度100％的峰为环戊酮,分别具有特征裂解产物1,8?二氮杂环十三烷?2,7?二酮和1,8?二氮杂环十四烷?2,7?二酮,PA6相对丰度100％的峰为己内酰胺;此方法可用于快速鉴别PA56、PA66和PA6的工业初级品,并成功检出了PA6/PA56共混物、PA6/PA66改性共混物与改性PA66.
机电安装工程从施工进场开始到水、暖、电联合试运行结束,贯穿整个施工过程,其重要性不言而喻[1].随着人们对公共建筑功能、质量、空间、舒适等方面要求的逐渐提高,机电安装过程也变得愈加复杂.其复杂性主要体现在材料、工种及安装工艺方面,施工过程中需要各专业相互协调配合,且需要投入大量的资源.公共建筑的设备管线繁多且复杂,管线碰撞冲突与协调困难等问题时有发生,势必会造成返工与成本的增加[2].而传统机电平面图纸更是让本就复杂的机电安装“雪上加霜”,施工单位拿到机电设计图需进行二次深化,否则无法直接施工.
采用实验方法系统研究了压扁阻断工艺参数,包括压管速度、松管速度、压缩率、环境温度和管径对聚乙烯(PE)管道力学响应的影响.结果表明,压管过程中PE管道载荷随着压管速度的增大、压缩率的增大、环境温度的降低或管径的增大而增大;卸载过程中PE管道的残余变形随松管速度的增大而增大;维持阶段PE管道的载荷衰减随着压管速度的增大、压缩率的降低、管径的减小或环境温度的降低而增大.
分析了行车记录仪面壳的结构特征及技术要求,设计了针对该产品的1模2腔的注塑模具,该模具具有4种不同类型的抽芯机构,第一种为定模隧道式拔块抽芯机构,第二种为倾斜式斜导柱抽芯机构,其中间位置还设置了第三种抽芯机构??双T形块抽芯机构,与前者具有联动关系,第四种为斜顶抽芯机构;文中还为倾斜式斜导柱抽芯机构和双T形块抽芯机构推导了抽芯距的计算公式,设计了开放式热流道转圆形分流道和扇形浇口的浇注系统,以及顶针、顶管和斜顶相结合的顶出模式.
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基于食品分子之间的相互作用构建生物活性成分递送体系具有重要意义.本研究选取姜黄素为活性成分,利用乳铁蛋白(LF)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和多糖(海藻酸钠、阿拉伯胶)为材料,采用碱处理制备LF-EGCG二元纳米颗粒,基于热诱导和静电作用方法,构建三元复合物,用荧光光谱和红外光谱分析三者的相互作用.结果表明:在三元复合物中乳铁蛋白与EGCG之间发生共价反应,多糖主要通过氢键和疏水相互作用与二元复合物结合.在此基础上,通过层层自组装法构建姜黄素乳液,分析其界面结构和稳定性.并对其流变特性、生物可及