【摘 要】
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目的 探讨原花青素(grape seed proanthocyanidins,GSP)提高人舌癌细胞系放射敏感性及机制.方法 2019年3月至2020年2月,将对数期生长的人舌癌Tca8113细胞分为对照组(Tca CON),Tca8113细胞加10 mg/L GSP组(Tca GSP-10 mg/L)、Tca8113细胞加20 mg/L GSP组(Tca GSP-20 mg/L)、Tca8113细胞照射组(Tca IR)、Tca8113细胞照射加10 mg/L GSP组(Tca IR+GSP-10 mg
【机 构】
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首都医科大学附属北京友谊医院口腔科,北京 100050;民航总医院口腔科,北京 100025
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目的 探讨原花青素(grape seed proanthocyanidins,GSP)提高人舌癌细胞系放射敏感性及机制.方法 2019年3月至2020年2月,将对数期生长的人舌癌Tca8113细胞分为对照组(Tca CON),Tca8113细胞加10 mg/L GSP组(Tca GSP-10 mg/L)、Tca8113细胞加20 mg/L GSP组(Tca GSP-20 mg/L)、Tca8113细胞照射组(Tca IR)、Tca8113细胞照射加10 mg/L GSP组(Tca IR+GSP-10 mg/L)、Tca8113细胞照射加20 mg/L GSP组(Tca IR+GSP-20 mg/L).MTT法检测加入不同浓度GSP对舌癌细胞Tca8113增殖的影响;流式细胞术检测6 MV X线直线加速器照射后(6 Gy)GSP对Tca8113细胞凋亡的影响;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测在加入不同浓度GSP作用下对照射后Tca8113细胞微小RNA(miR)-124表达的影响;蛋白质印迹法(Western blotting)检测加入不同浓度GSP作用下对照射后Tca8113细胞B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和胱天蛋白酶-9(caspase-9)蛋白水平的影响.结果 MTT法结果显示,Tca IR组、Tca IR+GSP-10 mg/L组及Tca IR+GSP-20 mg/L组Tca8113细胞存活率分别为(63.21±2.97)％、(41.19±4.33)％及(19.61±2.51)％,GSP加强了照射后对人舌癌Tca8113细胞的抑制,且随药物浓度的增大,抑制效果增强(F=126.30,P<0.001);流式细胞术结果显示,Tca IR组、Tca IR+GSP-10 mg/L组及Tca IR+GSP-20 mg/L组Tca8113细胞凋亡率分别为(7.62±0.27)％、(9.61±0.42)％及(17.50±0.37)％,GSP显著提高了照射后Tca8113细胞的凋亡率(F=55.77,P=0.001);qRT-PCR结果显示,Tca IR组、Tca IR+GSP-10 mg/L组及Tca IR+GSP-20 mg/L组Tca8113细胞miR-124的表达水平分别为(1.43±0.29)、(2.64±0.45)及(3.81±0.44),照射给药组(加10 mg/L GSP组、加20 mg/L GSP组)Tca8113细胞miR-124的表达有明显上调(F=26.54,P=0.001);蛋白质印迹法结果显示,与单纯照射组[Bcl-2:(0.77±0.25),caspase-9:(1.97±0.33)]相比,照射给药组[10 mg/L GSP Bcl-2及caspase-9分别为(0.43±0.23)、(2.58±0.43),20 mg/L GSP Bcl-2及caspase-9分别为(0.31±0.17)、(2.94±0.52)],Bcl-2表达明显下调(F=7.10,P=0.006),而caspase-9的表达明显上调(F=7.67,P=0.005).结论 GSP可能通过上调miR-124的表达和增强细胞凋亡提高舌癌Tca8113细胞的放射敏感性.
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