姬松茸多糖对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的保护作用

来源 :沈阳药科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mnjhkiuu
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目的 考察姬松茸多糖(Agaricus blazei polysaccharide,ABPS)对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞(H9C2)损伤的影响及潜在机制.方法 分别用H2O2(200 μmol·L-1)、ABPS(0.5、1.0、2.0 g·L-1)、LY294002(10 μmol·L-1)处理心肌细胞 H9C2,将 H9C2细胞分为 NC 组、H2O2组、H2O2+ABPS0.5 g·L-1 组、H2O2+ABPS 1.0 g·L-1组、H2O2+ABPS 2.0 g·L-1组、H2O2+ABPS+PBS组及H2O2+ABPS+LY294002组,CCK8实验和流式细胞术分别检测细胞存活率和凋亡率;Western blot分别检测细胞相关蛋白P21、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、Cleaved含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase 3,caspase-3)、Cleaved 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cysteinyl aspartate specific proteinase 9,Caspase-9)、p-蛋白激酶 B(Protein kinase B,AKT)和AKT的表达水平,试剂盒检测H9C2细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的水平.结果 与对照NC组相比,H2O2组心肌细胞H9C2的凋亡率、P21、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、p-AKT蛋白、ROS和MDA含量均升高,Cyclin D1、GSH-Px含量和细胞存活率均降低,差异具有统计学意义(P<0.05);0.5、1.0、2.0 g·L-1 ABPS均可逆转H2O2对心肌细胞H9C2的作用,呈剂量依赖趋势,且2.0 g·L-1 ABPS效果最好;经LY294002阻断AKT信号后,与H2O2+AB-PS+PBS 组相比,H2O2+ABPS+LY294002组细胞凋亡率、P21、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、p-AKT蛋白、ROS和MDA含量均升高,Cyclin D1、GSH-Px含量和细胞存活率均降低,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 姬松茸多糖通过AKT信号通路保护心肌细胞H9C2免受H2O2诱导的氧化应激损伤和凋亡.
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