【摘 要】
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背景：大量的研究已证实，外泌体具有促进成骨与血管化的作用，但是单纯的外泌体治疗存在靶向性差、负载分子含量无法达到治疗浓度等问题。目的：将外泌体负载于可注射葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇水凝胶中，通过体内与体外实验观察该水凝胶在种植体周围骨缺损中的作用。方法：从骨髓间充质干细胞中提取外泌体，并将其包裹于可注射葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇水凝胶中。（1）体外实验：将负
【基金项目】
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2019年度省市共建放射医学与防护国家重点实验室开放基金（GZK1201904）,项目负责人:沈明敬～～；
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背景：大量的研究已证实，外泌体具有促进成骨与血管化的作用，但是单纯的外泌体治疗存在靶向性差、负载分子含量无法达到治疗浓度等问题。目的：将外泌体负载于可注射葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇水凝胶中，通过体内与体外实验观察该水凝胶在种植体周围骨缺损中的作用。方法：从骨髓间充质干细胞中提取外泌体，并将其包裹于可注射葡萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇水凝胶中。（1）体外实验：将负载与未负载外泌体的水凝胶分别与内皮祖细胞共培养，进行外泌体摄取实验、小管形成实验以及细胞增殖、迁移能力、成血管基因检测。（2）体内实验：选取雄性新西兰大白兔12只，在一侧股骨长轴制备2个标准种植体窝洞及对应的骨缺损，在近心端的窝洞内植入种植体后，在骨缺损部位植入负载外泌体的水凝胶（实验组）；在远心端的种植窝洞内植入种植体后，在骨缺损部位植入未负载外泌体的水凝胶（对照组），术后3,6,9周取带种植体的骨缺损部位，进行苏木精-伊红、Masson染色，同时，术后9周时进行成骨基因与成血管基因检测。结果与结论：（1）体外实验：外泌体可进入内皮祖细胞中，负载外泌体水凝胶组内皮祖细胞的增殖能力、迁移能力、成血管能力及成血管基因（CD31、血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子）表达均高于未未负载外泌体水凝胶组（P ＜0.05）。（2）体内实验：苏木精-伊红、Masson染色显示，术后3周时，两组仅见少量新生骨，材料部分降解；术后6周时，两组新生骨量增加，其中实验组可见大量的新生骨，钙盐沉积明显；术后9周时，相较于对照组，实验组可见大量粗大于成熟的骨小梁，钙盐沉积更加明显，骨小梁周围可见大量排列的成骨细胞。实验组术后9周骨缺损部位的CD31、血管内生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白2、Ⅰ型胶原及骨钙素的蛋白表达均高于对照组（P ＜0.05）。（3）负载外泌体的萄糖酸内酯-海藻酸钠/β-磷酸三钙-聚乙二醇水凝胶可促进内皮祖细胞的增殖、迁移与成血管分化，促进种植体周围骨缺损的修复再生。
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