【摘 要】
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目的 探讨酪酸梭菌-糯米复合发酵液对鼠伤寒沙门菌的抑制作用及其对小鼠肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的影响.方法 将酪酸梭菌(1.5×1010 CFU·L-1)和体积分数5％的无菌糯米粉放入到100 mL胰蛋白胨大豆肉汤,于37℃条件下培养48 h,配制酪酸梭菌-糯米复合发酵液,采用显微镜平板菌落计数方法检测酪酸梭菌-糯米复合发酵液和酪酸梭菌悬液中酪酸梭菌,琼脂打孔体外抑菌圈法检测酪酸梭菌-糯米复合发酵液及其稀释液(1:2、1:4、1:8、1:16)对鼠伤寒沙门菌的抑制作用,显微镜平板菌落计数方法检测酪
【机 构】
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新乡医学院公共卫生学院卫生毒理学教研室,河南 新乡 453003;新乡医学院公共卫生学院卫生毒理学教研室,河南 新乡 453003;韩陵医药研究院有限公司,江苏 南京 211100;新乡医学院第一附属
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目的 探讨酪酸梭菌-糯米复合发酵液对鼠伤寒沙门菌的抑制作用及其对小鼠肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的影响.方法 将酪酸梭菌(1.5×1010 CFU·L-1)和体积分数5％的无菌糯米粉放入到100 mL胰蛋白胨大豆肉汤,于37℃条件下培养48 h,配制酪酸梭菌-糯米复合发酵液,采用显微镜平板菌落计数方法检测酪酸梭菌-糯米复合发酵液和酪酸梭菌悬液中酪酸梭菌,琼脂打孔体外抑菌圈法检测酪酸梭菌-糯米复合发酵液及其稀释液(1:2、1:4、1:8、1:16)对鼠伤寒沙门菌的抑制作用,显微镜平板菌落计数方法检测酪酸梭菌悬液、无细胞发酵液、酪酸梭菌-糯米复合发酵液、糯米发酵液、磷酸盐缓冲液(PBS)、四环素对鼠伤寒沙门菌的抑制作用.应用200μL鼠伤寒沙门菌悬液(1×1012 CFU·L-1)对60只雄性6周龄ICR小鼠进行灌胃,每日1次,连续灌胃7 d构建鼠伤寒沙门菌感染小鼠模型,将鼠伤寒沙门菌感染小鼠随机分为糯米发酵液组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组、PBS阴性对照组、四环素阳性对照组,每组10只,分别给予酪酸梭菌悬液、无细胞发酵液、酪酸梭菌-糯米复合发酵液、糯米发酵液、PBS、体积分数0.2％四环素各200μL灌胃,每日1次,连续灌胃21 d,应用显微镜平板菌落计数方法检测小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌株数,酶联免疫吸附测定法检测肠道内sIgA表达水平,监测小鼠食物摄取量和体质量,计算体质量增加率.结果 培养24 h后,酪酸梭菌-糯米复合发酵液中酪酸梭菌菌落数显著多于酪酸梭菌悬液(P0.05);第21天,四环素阳性对照组和酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于PBS阴性对照组、糯米发酵液组、酪酸梭菌悬液组和无细胞发酵液组(P<0.05).第28天,四环素阳性对照组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于PBS阴性对照组和糯米发酵液组,四环素阳性对照组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于酪酸梭菌悬液组和无细胞发酵液组,酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠体内鼠伤寒沙门菌菌落数显著少于四环素阳性对照组(P<0.05).酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠肠道内sIgA水平显著高于四环素阳性对照组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组和PBS阴性对照组,四环素阳性对照组小鼠肠道内sIgA水平显著高于酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组和PBS阴性对照组,酪酸梭菌悬液组小鼠肠道内sIgA水平显著高于无细胞发酵液组、糯米发酵液组和PBS阴性对照组,无细胞发酵液组小鼠肠道内sIgA水平显著高于糯米发酵液组和PBS阴性对照组(P<0.05).四环素阳性对照组和糯米发酵液组小鼠的食物摄取量高于酪酸梭菌悬液组、PBS阴性对照组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组(P<0.05);酪酸梭菌悬液组和酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠的体质量增加量高于PBS阴性对照组、四环素阳性对照组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组(P<0.05),四环素阳性对照组、无细胞发酵液组、糯米发酵液组小鼠的体质量增加量高于PBS阴性对照组(P<0.05);四环素阳性对照组、糯米发酵液组、酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠的体质量增加率高于PBS阴性对照组,酪酸梭菌悬液组、无细胞发酵液组、酪酸梭菌-糯米复合发酵液组小鼠的体质量增加率高于四环素阳性对照组、糯米发酵液组(P<0.05).结论 酪酸梭菌-糯米复合发酵液可显著抑制鼠伤寒沙门菌生长,提高机体免疫力,这为多重耐药鼠伤寒沙门菌感染膳食干预策略的制定提供了新的思路和依据.
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