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目的探讨CD40-CD40配体(CD40-CD40L)信号通路在胃癌细胞AGS细胞增殖和侵袭过程中的作用。方法细胞培养分成对照组(仅加入含有10%FBS的F12培养基)、sCD40L组、LY294002组和sCD40L+LY294002组。通过酶联免疫吸附实验(enyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞上清中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的浓度、细胞计数和氚[3H]标记的胸腺嘧啶核苷渗入法测定观察细胞生长和增殖的情况,Transwell实验观察LY294002抗对sCD40L影响GAS胃癌细胞侵袭的作用。蛋白质印迹法检测细胞PI3K、p-Akt蛋白表达水平。结果胃癌细胞AGS表达较高水平CD40,sCD40L组的细胞计数为(3.8±0.3)×105,较对照组(5.3±0.4)×105明显减少,差异有统计学意义,P=0.007。sCD40L组VEGF浓度为(161.3±28.04)pg/mL,与对照组(48.67±6.03)pg/mL比较明显增高,差异有统计学意义,P=0.002;LY294002+sCD40L组VEGF的浓度为(60.67±8.02)pg/mL,明显低于对照组的(161.3±28.04)pg/mL,P=0.004。sCD40L组的刺激指数为(0.82±0.16),明显高于LY294002+sCD40L组的刺激指数(0.56±0.15),差异有统计学意义,P=0.046。对照组中每个视野平均细胞数为(72.67±5.76)个,明显高于sCD40L组的(46.67±2.53)个,差异有统计学意义,P=0.002;LY294002+sCD40L组平均每个视野细胞为(8.67±2.52)个,较sCD40L组的(46.67±2.53)个明显较少,差异有统计学意义,P<0.001;与对照组相比,sCD40L使PI3K、p-Akt蛋白表达升高,与LY294002联合作用后,PI3K、p-Akt蛋白表达明显降低,P<0.05。结论CD40-CD40L相互作用抑制胃癌细胞增殖及胃癌的侵袭,同时阻断PI3K-AKT信号通路,可以增强sCD40L对胃癌AGS增殖和侵袭的抑制作用。