RNA干扰糖原合成激酶-3β对胰腺癌细胞生长的抑制作用

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:frog_t
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目的 观察沉默糖原合成激酶-3β(GSK-3β)对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖和存活的影响,探讨其分子机制.方法 实验分组如下:阴性对照组为未转染的PANC-1细胞;载体对照组为稳定转染control shRNA的PANC-1细胞;实验组为稳定转染GSK-3β shRNA的PANC-1细胞.噻唑蓝(MTT)比色法连续7d检测各组细胞的吸光度(A)值,并绘制出细胞的生长曲线;流式细胞仪(FCM)检测各组细胞的凋亡和周期;电泳迁移率实验(EMSA)检测各组细胞中核因子(NF)-κB的DNA结合活性.结果 转染GSK-3β短发卡RNA (shRNA)的实验组PANC-1细胞生长速度明显减慢;实验组细胞的早期凋亡比例为(5.38±0.33)%,较阴性对照组(1.71±0.08)%和载体对照组(1.68 ±0.11)%显著升高(P<0.05);实验组中G0/G1期细胞比例为(60.02±1.99)%,较阴性对照组(46.56±3.13)%和载体对照组(46.04±2.92)%显著升高(P<0.05),发生明显的G1期阻滞;实验组细胞中代表NF-κB复合体数量的条带A值为2186.37±225.51,与阴性对照组(4005.39±203.64)和载体对照组(3793.32 ±310.34)比较显著减少(P<0.05);而上述对照组组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 靶向抑制GSK-3β可抑制胰腺癌细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能与下调NF-κB的转录活性有关。

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