氟对体外培养大鼠成骨细胞中核因子-κB受体活化因子配体/骨保护素表达的影响

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目的 探讨氟对体外培养大鼠成骨细胞中骨保护素(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子-κB受体活化因子(RANK)信号传导通路的影响.方法 取新生24h内SD大鼠仔鼠,应用酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞,取第2代成骨细胞,加入不同浓度[0(对照)、1×10-3、1×104、1×10-5、1×10-6、1×10-7mol/L]的氟,培养24、48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测成骨细胞RANKL、OPG mRNA表达;蛋白免疫印迹(Westem blot)法检测成骨细胞RANKL、OPG蛋白表达.结果 ①染氟24 h,成骨细胞RANKL、OPGmRNA表达组间比较差异有统计学意义(F值分别为30.95、22.62,P均<0.01),其中1×10-5 mol/L组成骨细胞RANKL mRNA (5.99±0.39)和1×10-4、1×10-5、1×10-6 mol/L组OPG mRNA(3.52±0.09、4.81±0.15、3.68±0.04)的表达高于对照组(3.20±0.19、3.09±0.58,P均<0.05),1×10-3 mol/L组RANKL mRNA (2.29±0.18)的表达低于对照组(P均<0.05);染氟48 h,成骨细胞RANKL、OPG mRNA的表达组间比较差异有统计学意义(F值分别为26.62、5.72,P均<0.01),其中1×10-5 mol/L组成骨细胞RANKL、OPG mRNA(6.67±0.49、5.05±0.51)的表达高于对照组(4.29±0.07、4.34±0.12,P均<0.05),1×10-3 mol/L组OPG mRNA (3.63±0.49)的表达低于对照组(P<0.05).②成骨细胞RANKL蛋白表达在染氟24、48 h后,组间比较差异无统计学意义(F值分别为0.07、0.49,P均>0.05).成骨细胞OPG蛋白的表达,染氟24h后组间比较差异有统计学意义(F=3.26,P<0.05),1×10-5 mol/L组(1.45±0.10)高于对照组(1.05±0.06,P<0.05);染氟48 h,成骨细胞OPG蛋白表达组间比较差异无统计学意义(F=0.44,P> 0.05).结论 氟在低浓度时以成骨活动为主;但随着染氟时间和浓度的增加,促进破骨细胞的分化、成熟,以骨吸收为主。

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