探讨葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)在七氟醚预处理抑制大鼠心肌细胞凋亡中的作用。

采用随机数字表法将培养的大鼠心肌细胞分5组(n＝30)，正常对照组(C组)：细胞不经任何处理；缺氧复氧组(H/R组)：细胞在95%N₂-5%CO₂混合气体中缺氧2 h后放回95%空气-5%CO₂ 37 ℃培养箱内复氧1 h；七氟醚预处理组(S组)：细胞经2.5%七氟醚孵育20 min，洗脱10 min后进行缺氧复氧；siRNA-GRP78组：采用siRNA-GRP78 100 nmol/L转染心肌细胞，24 h后进行七氟醚预处理及缺氧复氧处理；siRNA对照组(siRNA组)：采用随机序列核酸siRNA转染心肌细胞，其它处理同siRNA-GRP78组。各组处理结束后，采用Western blot法测定心肌细胞GRP78、胞浆和线粒体细胞色素c的表达；采用ELISA法测定培养液LDH和CK的活性；采用流式细胞仪测定细胞凋亡率；采用Fura-2/AM钙离子荧光探针法测定细胞内游离Ca^2＋浓度([Ca^2＋]_i)；采用荧光分光光度法测定线粒体膜通透性转运孔(mPTP)开放程度。

与C组比较，H/R组心肌细胞GRP78和胞浆细胞色素c表达上调，培养液LDH和CK活性、细胞凋亡率、[Ca^2＋]_i升高，线粒体细胞色素c表达下调(P<0.01)；与H/R组比较，S组心肌细胞GRP78和线粒体细胞色素c表达上调，培养液LDH和CK活性、细胞凋亡率、[Ca^2＋]_i和mPTP开放程度降低，胞浆细胞色素c表达下调(P<0.01)，siRNA组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)；与S组比较，siRNA-GRP78组心肌细胞GRP78和线粒体细胞色素c表达下调，培养液LDH和CK活性、细胞凋亡率、[Ca^2＋]_i和mPTP开放程度升高，胞浆细胞色素c表达上调(P<0.01)。

GRP78参与了七氟醚预处理抑制大鼠心肌细胞凋亡的作用，机制与维持细胞内Ca^2＋稳态，抑制mPTP开放有关。