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血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的PCR产物克隆于T载体上，经转化JM109感受态菌株后，随机挑取8个白斑菌落，混合后制成混合模板,采用3条引物，做两轮重叠PCR反应，获得了VEGF的突变基因，经PCR鉴定，酶切鉴定和测序分析表明所得基因为目的产物,实践证明这种突变方法简单快速，为下一步实验大量引入突变奠定了实验基础。