葡萄VviHKT1;1基因启动子的克隆与表达分析

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HKT1;1转运蛋白是一类具有Na+转运功能的蛋白,在植物抗盐中起关键作用。为了探究葡萄中VviHKT1;1基因在盐胁迫下的表达模式,用荧光定量PCR技术检测了VviHKT1;1在不同盐浓度,不同组织及不同处理时间的表达量,发现VviHKT1;1在葡萄茎中的表达量远高于根和叶;不同盐浓度处理后, VviHKT1;1在根和茎中的表达量随着盐浓度的升高而显著降低,叶中除100 mmol·L-1 NaCl外,其余盐浓度下表达量稍有升高;盐处理2 d后, VviHKT1;1表达量在葡萄根和茎中明显降低,但在葡萄叶片中随着盐胁迫时间延长显著升高。随后,克隆了VviHKT1;1上游1 620 bp启动子序列,通过PlantCARE预测发现该区域有多个激素和逆境响应元件。用该启动子与GUS报告基因融合构建植物表达载体,并转化拟南芥,通过GUS染色与荧光定量分析了启动子对盐胁迫的响应。结果一致显示, GUS主要分布在地上部分,并且在盐胁迫后GUS在叶中的表达量比根中有明显增加。因此,我们推测盐处理后,地上部分可以加强VviHKT1;1表达将地上部分较多的Na+再回流到根,以降低地上部分的Na+积累缓解盐害。
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