【摘 要】
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目的探讨shRNA表达载体的构建方法 ,以加速RNA干扰研究的进程。方法对shRNA表达载体的构建过程进行分析和监测 ,并加以优化。结果发现shRNA表达载体构建的退火过程容易产生障
【机 构】
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重庆医科大学病毒性肝炎研究所; Molecular Oncology Laboratory; The University of Chicago Medical Center;
【基金项目】
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国家杰出青年基金 ( 3 0 2 2 5 0 2 6);国家青年科学基金 ( 3 0 3 0 0 2 98)
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目的探讨shRNA表达载体的构建方法 ,以加速RNA干扰研究的进程。方法对shRNA表达载体的构建过程进行分析和监测 ,并加以优化。结果发现shRNA表达载体构建的退火过程容易产生障碍 ,经优化退火缓冲液的NaCl含量后 ,能明显提高退火效率及shRNA表达载体构建的成功率。结论shRNA表达载体构建的退火过程需加以关注 ,退火缓冲液中NaCl含量应提高至 2 0 0mmol/L以上为宜
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