赤羽病病毒囊膜糖蛋白G1基因的截短表达、纯化及间接ELISA诊断方法的建立

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yhmlivefor53

【摘要】

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为获得赤羽病病毒（Akabane virus,AKAV）囊膜糖蛋白重组抗原作诊断应用研究，通过软件分析AKAV OBE-1株的囊膜糖蛋白G1的氨基酸序列，筛选出抗原性较好的基因片段G1-2作为目的片段，经

【作者】

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徐树兰童铁钢白宇辛九庆王群张维军孙庆歌吴东来

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家兽医生物技术重点实验室

【出处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

：

2008年4期

【关键词】

：

赤羽病病毒囊膜糖蛋白表达纯化ELISA Akabane virus glycoprotein expression and purification

【基金项目】

：

基金项目：国家高技术研究与发展计划（863）项目（No.2006AA10A203）和黑龙江省自然科学基金重点项目（No.ZJN-0602-01）资助.

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为获得赤羽病病毒（Akabane virus,AKAV）囊膜糖蛋白重组抗原作诊断应用研究，通过软件分析AKAV OBE-1株的囊膜糖蛋白G1的氨基酸序列，筛选出抗原性较好的基因片段G1-2作为目的片段，经RT-PCR扩增后，插入pMD18-T载体。经测序鉴定正确后，将该片段定向亚克隆于pET-28a（＋）表达载体中，转化至BL21（DE3）感受态细胞中进行诱导表达。经SDS-PAGE和Westem blot分析，诱导表达产物以包涵体的形式存在，大小约为44kD，且具有免疫学活性。亲和纯化后的融合蛋白浓度为

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