人胱蛋白酶抑制剂C的原核表达及其免疫反应性研究

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目的获得具有免疫反应性的人胱蛋白酶抑制剂C(Cysc)重组蛋白。方法从Hela细胞提取总RNA,采用RTPCR扩增获得人CysC基因片段,与质粒pET30a连接构建重组表达载体,转化大肠埃希菌E.coliBL21(DE3)并加入IPTG诱导表达,表达产物经凝胶层析复性和亲和层析纯化后,用间接ELISA检测纯化后的CysC重组蛋白对重组CysC免疫小鼠血清的免疫反应性。结果成功构建了重组表达载体pET30a—CysC,诱导表达出约19ku的重组蛋白,经复性纯化后获得纯度达90%以上的目的蛋白,与重组CysC
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