【摘 要】
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【目的】由大豆花叶病毒（soybean mosaic virus,SMV）引起的大豆花叶病是世界性大豆病害之一，利用病毒诱导的基因沉默（virus induced gene silencing,VIGS）技术研究GmSZFP在大豆与SMV互作过程中发挥的功能，为深入探讨其分子机制奠定基础。【方法】以大豆品种冀豆7号与SMV毒株SC-8、N3组成的亲和、不亲和组合为试验材料，运用生物信息学预测GmS
【机 构】
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河北农业大学生命科学学院/华北作物改良与调控国家重点实验室/河北省植物生理与分子病理学重点实验室
【基金项目】
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河北省自然科学基金（C2020204132）;河北省自然科学基金创新研究群体项目（C2020301020）； 河北省现代农业产业技术体系创新团队建设大豆产业创新团队（326-0702-JSNTKSF）； 河北省科技厅现代种业科技创新专项子课题（21326313D-1）；
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【目的】由大豆花叶病毒（soybean mosaic virus,SMV）引起的大豆花叶病是世界性大豆病害之一，利用病毒诱导的基因沉默（virus induced gene silencing,VIGS）技术研究GmSZFP在大豆与SMV互作过程中发挥的功能，为深入探讨其分子机制奠定基础。【方法】以大豆品种冀豆7号与SMV毒株SC-8、N3组成的亲和、不亲和组合为试验材料，运用生物信息学预测GmSZFP的分子结构特征；以酵母转录激活试验检测其转录因子活性；借助实时定量PCR（RT-qPCR）验证GmSZFP在大豆与SMV互作中转录水平的表达特征；结合VIGS技术探究GmSZFP在大豆与SMV互作过程中的功能。【结果】通过PCR克隆GmSZFP的CDS区，序列全长为1 071 bp；氨基酸序列分析和酵母转录激活试验发现GmSZFP为C2H2型锌指蛋白转录因子，且具有转录激活活性；RT-qPCR结果显示，GmSZFP受SMV的强烈诱导，在亲和组合与不亲和组合中的表达模式不同，在不亲和组合中，GmSZFP呈先上升后下降的表达趋势，其表达水平明显高于亲和组合，若在接种病毒前给叶片预注射咪唑，GmSZFP的表达水平降低，并与亲和组合相近，说明GmSZFP在转录水平响应SMV的侵染并受胞内H2O2信号调控；利用VIGS技术沉默GmSZFP后，发现接种部位胼胝质的积累水平较对照大大降低，RT-qPCR检测胼胝质合酶基因GmGSL7c和GmGSL12b的表达量较对照降低，胼胝质水解酶基因BG的表达量较对照增加；在基因沉默植株叶片上点接种SMV后72 h，病毒向外扩散至2 mm，在96 h时病毒扩散至3 mm，而对照组叶片在接种点外始终未能检测到SMV外壳蛋白CP的表达；摩擦接种SMV后10 d，在基因沉默植株的上位叶表现出花叶、失绿和卷曲等感病症状，并检测到CP的表达，说明沉默GmSZFP后，SMV在胞间扩散和长距离运输的能力均增强。【结论】大豆GmSZFP是典型的C2H2型单锌指蛋白，GmSZFP在大豆抵抗SMV侵染过程中发挥正调控作用。
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