【摘 要】
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目的 研究炎症性内脏高敏大鼠背根神经节(DRG)基因表达的变化及电压门控钙离子通道(VGCC)在炎症性内脏高敏感性中的作用.方法 雄性清洁级SD大鼠180只,体重200～300 g,三硝基苯
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,上海交通大学医学院神经生物学教研室
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目的 研究炎症性内脏高敏大鼠背根神经节(DRG)基因表达的变化及电压门控钙离子通道(VGCC)在炎症性内脏高敏感性中的作用.方法 雄性清洁级SD大鼠180只,体重200～300 g,三硝基苯磺酸(TNBS)模型组(n=90)缓慢注入2.0%TNBS,剂量为100 mg/kg;正常对照组(n=90)仅灌注等量0.9%氯化钠溶液.造模后第4天,大鼠的cDNA表达谱基因芯片检测大鼠1.6S2节段DRG基因表达谱变化.通过实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测进行验证.胞内钙检测及全细胞膜片钳记录分析胞内钙及电压门控钙电流变化.另取SD大鼠54只,均分为6组,分别予以TNBS造模及脊髓鞘内给予特异性钙通道阻滞剂,观察大鼠内脏敏感性的变化.腹部撤离反射(AWR)检测大鼠内脏敏感性.结果 TNBS模型组L6～s2节段DRG172个基因的表达出现显著变化,包括离子通道、膜受体及胞内第二信使等.其中,L-型钙通道(Cav 1.2)和R-型钙通道(Cav2.3)显著上调,RT-PCR及Western印迹检测结果均验证了芯片结果.胞内钙检测显示,TNBS模型组结肠特异感觉神经元的静息胞内钙含量与正常对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);而胞内钙瞬变量较正常对照组显著增加(P＜0.05).全细胞膜片钳记录显示TNBS模型组结肠初级感觉神经元L-型和R-型钙电流较正常对照组明显增加(P＜0.05).脊髓鞘内给予尼莫地平和SNX-482后可显著降低炎症性内脏高敏大鼠的内脏敏感性(P＜0.05).结论 Cav1.2和Cav2.3表达的上调在炎症性内脏高敏中起了非常重要的作用,很可能是炎症性内脏高敏治疗的潜在靶点.
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