目的:建立可鉴别大、小黄鱼鱼鳔及其混淆品的高特异性聚合酶链式反应(PCR)方法。方法:根据大、小黄鱼及6种常见混淆品线粒体12S r RNA基因序列,设计两对专用于大、小黄鱼鱼鳔的鉴别引物Fish-F1、Fish D-R1与Fish-F1、Fish X-R2;采用PCR法在不同的复性温度扩增,确立特异性反应条件。结果:在94℃预变性5 min;94℃变性30 s,60.4℃复性30 s,72℃延伸30 s,30个循环;72℃延伸5 min扩增条件下,大黄鱼鱼鳔得到约670 bp的扩增带,而小黄鱼和混淆品鱼鳔在同样的条件下无扩增带。在94℃预变性5 min;94℃变性30 s,64.8℃复性30 s,72℃延伸30 s,30个循环;72℃延伸5 min扩增条件下,小黄鱼鱼鳔得到约670 bp的扩增带,而大黄鱼和混淆品鱼鳔在同样的条件下无扩增带。结论:设计的鉴别引物对大、小黄鱼鱼鳔有高度的特异性。本方法简单、准确、快速、重现性好、稳定性高,能有效鉴别大、小黄鱼鱼鳔及其混淆品。