【摘 要】
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目的 DCLAK11是一种新型小分子酪氨酸激酶抑制剂,可显著抑制非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖并促进其凋亡,其作用机制值得深入探究。本研究探讨DCLA
【机 构】
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内蒙古自治区人民医院药学处; 中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室;
【基金项目】
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内蒙古自治区自然科学基金(2016MS0833);内蒙古自治区人民医院院内基金(201524)
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目的 DCLAK11是一种新型小分子酪氨酸激酶抑制剂,可显著抑制非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖并促进其凋亡,其作用机制值得深入探究。本研究探讨DCLAK11是否通过线粒体凋亡通路发挥抗肿瘤作用。方法细胞增殖检测试剂盒8(cell counting kit 8,CCK8)检测细胞存活率;AnnexinⅤ-PI染色检测细胞凋亡率;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)染色检测线粒体膜电位;蛋白质印迹法检测Bcl-2家族蛋白Bcl-xL、Bax、Bid、Bim、Bad和Cleaved Caspase-9表达水平。结果 DCLAK11可抑制NSCLC细胞HCC827 (IC50=10nmol/L)和HCC4006(IC50=20nmol/L)增殖,且抑制作用具有浓度依赖性。AnnexinⅤ-PI染色结果显示,当给予不同浓度DCLAK11处理48h后,HCC827细胞凋亡率分别为(34.90±6.22)%、(49.33±10.42)%、(53.77±4.55)%和(62.87±3.19)%,与对照组比较差异有统计学意义,F=29.990,P<0.001;HCC4006细胞凋亡率分别为(12.36±2.80)%、(21.38±3.28)%、(32.14±6.44)%和(33.53±8.32)%,与对照组比较差异有统计学意义,F=46.439,P<0.001。JC-1染色结果显示,DCLAK11增加HCC827和HCC4006细胞中去极化细胞比例,与对照组比较差异均有统计学意义(F=63.910,P<0.001;F=11.831,P=0.001)。蛋白质印迹法结果显示,DCLAK11增加HCC827和HCC4006中Bcl-2家族促凋亡蛋白Bid、Bim、Bad和Bax表达,降低抗凋亡蛋白Bcl-xL表达及Bcl-xL/Bax比值,以及上调Cleaved Caspase-9表达。结论 DCLAK11通过线粒体凋亡通路发挥对NSCLC细胞的抗肿瘤作用。
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