【摘 要】
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目的:获得高效价PC-1蛋白的兔多克隆抗体,用于PC-1功能的实验。方法:实验于2004-02/08在解放军军事医学科学院生物工程研究所完成。以纯化后的PC-1蛋白及其N端46个氨基酸与GS
【机 构】
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解放军军事医学科学院生物工程研究所; 解放军军医进修学院泌尿外科; 解放军军事医学科学院生物工程研究所 北京市100850解放军军医进修学院泌尿外科北京市100853;
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目的:获得高效价PC-1蛋白的兔多克隆抗体,用于PC-1功能的实验。方法:实验于2004-02/08在解放军军事医学科学院生物工程研究所完成。以纯化后的PC-1蛋白及其N端46个氨基酸与GST的融合蛋白(GST-PC-1和GST-PC-1-46)为抗原,通过一种经淋巴结注射、免疫家兔的改进的免疫方法制备兔多克隆抗体。应用ProteinA亲和层析纯化抗体。以酶联免疫吸附和Western-blot及免疫组化法鉴定所得抗体。结果:①2个兔多克隆抗体的效价分别为1∶12800和1∶51200。②PC-1在高恶性前列腺癌细胞C4-2中高表达,在低恶性前列腺癌细胞LNCaP中有少量表达。③经免疫组化染色后,含有PC-1蛋白的C4-2及LNCaP细胞均呈阳性反应,细胞质中可见明显着色,而空泡状的胞核则没有着色,提示PC-1蛋白主要分布在细胞浆中。结论:用一种改进的免疫方法,获得高效价的、可应用于酶联免疫吸附和Western-blot及免疫组化实验的PC-1蛋白兔多克隆抗体。
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