米酵母双杂交cDNA文库的构建及ZmCEN互作蛋白的筛选

来源 :西北植物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：asqw_

【摘要】

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阐明玉米中心蛋白（ZmCEN）的生物学功能，采用酵母双杂交技术对其互作蛋白进行研究。提取玉米（ Zea mays L.）自交系‘郑58’幼苗的总RNA，利用SMART 技术反转录合成ds cDNA，构建以pGBKT

【作者】

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白凤麟1 段永红王志军雷海英

【机构】

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长治学院生物科学与技术系,山西农业大学农学院,长治学院化学系

【出处】

：

西北植物学报

【发表日期】

：

2018年4期

【关键词】

：

ZmCEN SMART技术 CDNA文库酵母双杂交 BIFC GO分析 ZmCEN SMART technology cDNA library yeast t

【基金项目】

：

国家自然科学基金（21201024）,山西省重点学科建设项目（FSKSC）,山西省大学生创新创业训练计划（2017428）

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阐明玉米中心蛋白（ZmCEN）的生物学功能，采用酵母双杂交技术对其互作蛋白进行研究。提取玉米（ Zea mays L.）自交系‘郑58’幼苗的总RNA，利用SMART 技术反转录合成ds cDNA，构建以pGBKT7 为载体的酵母双杂交 cDNA 文库；依据 ZmCEN 基因的CDS序列设计引物，构建重组诱饵载体（pGBKT7- ZmCEN ）转化酵母菌株Y2HGold，检测诱饵载体的毒性与自激活能力后，筛选与玉米中心蛋白（ZmCEN）互作的猎物蛋白。将筛选的互作蛋白NAC67和TONNEAU1b （TO

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