【摘 要】
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目的 探讨丙泊酚对过氧化氢（H2O2）诱导的HT22细胞凋亡的影响及其对沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）-叉头框蛋白O1（FoxO1）信号通路的影响。方法 首先利用H2O2建立HT22细胞损伤模型,丙泊酚干预后,利用细胞计数试剂盒（CCK8）检测细胞存活率和筛选H2O2合适作用浓度,活性氧荧光探针（DCFH-DA）检测细胞内活性氧（ROS）水平,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）/还原型烟酰胺
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目的 探讨丙泊酚对过氧化氢（H2O2）诱导的HT22细胞凋亡的影响及其对沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）-叉头框蛋白O1（FoxO1）信号通路的影响。方法 首先利用H2O2建立HT22细胞损伤模型,丙泊酚干预后,利用细胞计数试剂盒（CCK8）检测细胞存活率和筛选H2O2合适作用浓度,活性氧荧光探针（DCFH-DA）检测细胞内活性氧（ROS）水平,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）检测试剂盒检测细胞内NAD含量,Westernblot检测SIRT1、FoxO1及细胞凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Bcl2关联X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、细胞色素C（Cyt C）的表达水平。结果 与对照组比较,在一定浓度范围内,随着H2O2浓度增加,HT22细胞存活率逐渐下降,差异具有统计学意义（P＜0.05）。H2O2诱导细胞损伤的IC50为234.13μM。与对照组比较,100μM H2O2处理HT22细胞24 h后,HT22细胞存活率为75.62%。本研究通过实验摸索和调整结合参考文献最终确定100μM作为本次实验的处理浓度。H2O2组细胞内ROS及凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Bax、Cyt C蛋白的表达水平显著高于对照组,丙泊酚组低于对照组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。H2O2和丙泊酚联合处理组细胞内ROS及凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Bax、Cyt C蛋白的表达水平低于H2O2组,高于丙泊酚组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。H2O2组细胞内SIRT1和FoxO1蛋白的表达水平、NAD水平明显低于对照组,丙泊酚组明显高于对照组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。H2O2和丙泊酚联合处理组细胞内SIRT1和FoxO1的表达水平、NAD水平高于H2O2组,低于丙泊酚组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论 丙泊酚对H2O2诱导HT22细胞损伤具有的保护作用,其作用机制可能与激活SIRT1-FoxO1信号通路来减轻氧化应激水平,降低细胞凋亡有关。
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