【摘 要】
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为了使黑曲霉脂肪酶基因在毕赤酵母中表达并实现高密度发酵生产,采用PCR方法从黑曲霉基因组DNA中扩增出脂肪酶基因LipA,测序结果表明LipA基因编码区全长894 bp,编码297个氨基
【机 构】
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义马煤业集团煤生化高科技工程有限公司,河南工业大学生物工程学院
【基金项目】
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河南省产学研合作项目(142107000024)
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为了使黑曲霉脂肪酶基因在毕赤酵母中表达并实现高密度发酵生产,采用PCR方法从黑曲霉基因组DNA中扩增出脂肪酶基因LipA,测序结果表明LipA基因编码区全长894 bp,编码297个氨基酸,与其他黑曲霉脂肪酶基因列序相似性高达99%。将LipA基因连接到质粒pPIC9K上,构建了pPIC9K-LipA重组载体。将该重组载体转化到毕赤酵母GS115中,经甲醇诱导,该酶基因在酵母细胞中获得活性表达,并能将酶蛋白分泌到胞外。重组菌株GS115/pPIC9K-LipA经100 L发酵罐发酵144 h,菌体湿重高达
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