【摘 要】
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目的 研究体外异柠檬酸脱氢酶1(IDH1R132H)突变对胶质瘤细胞的影响.方法 首先挖掘数据库信息,分析IDH1R132H突变胶质瘤患者的临床预后生存情况.之后利用慢病毒转染技术,构建两株胶质瘤细胞SF295和A172体外IDH1R132H突变细胞模型,包括IDH1R132H突变组(IDH1 Mut组)和对照组(IDH1 NC组).通过对胶质瘤细胞基因突变位点测序,Western blot实验检测突变基因表达的蛋白和IDH1R132H突变代谢产物2-羟基戊二酸(D2HG).比较两株胶质瘤细胞IDH1 M
【机 构】
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中山大学附属第七医院科研中心,广东深圳518107;中山大学附属第七医院肿瘤科,广东深圳518107;中山大学附属第七医院神经医学中心,广东深圳518107;中南大学湘雅医院神经外科,湖南长沙4100
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目的 研究体外异柠檬酸脱氢酶1(IDH1R132H)突变对胶质瘤细胞的影响.方法 首先挖掘数据库信息,分析IDH1R132H突变胶质瘤患者的临床预后生存情况.之后利用慢病毒转染技术,构建两株胶质瘤细胞SF295和A172体外IDH1R132H突变细胞模型,包括IDH1R132H突变组(IDH1 Mut组)和对照组(IDH1 NC组).通过对胶质瘤细胞基因突变位点测序,Western blot实验检测突变基因表达的蛋白和IDH1R132H突变代谢产物2-羟基戊二酸(D2HG).比较两株胶质瘤细胞IDH1 Mut组和IDH1 NC组细胞的增殖情况,Transwell实验检测两组细胞的侵袭能力,细胞划痕实验分析两组细胞的迁移能力.结果 首先成功构建了两株IDH1R132H突变胶质瘤细胞模型SF295和A172,测序结果显示两株胶质瘤细胞中IDH1 Mut组的IDH1基因位点突变成功,并且成功检测到突变基因蛋白IDH1的表达和突变代谢产物D2HG.之后细胞表型实验显示,与IDH1 NC组比较,IDH1 Mut组细胞增殖速度明显变慢,细胞侵袭能力下降,细胞迁移能力显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 体外实验表明,IDH1R132H突变能够抑制胶质瘤细胞增殖、侵袭、迁移表型,显示出IDH1R132H突变在胶质瘤分子治疗中的潜力.
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