【摘 要】
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目的富集裸鼠乳腺癌移植瘤中的乳腺癌干细胞并进行分选。方法将人乳腺癌MDA-MB-231细胞接种于20只裸鼠右侧腋窝皮下，观察肿瘤的生长情况，30d后剥离肿瘤，对组织进行HE染色，并从组织中分离出肿瘤细胞。用含血清的DMEM培养液培养分离出的移植瘤细胞，观察移植瘤细胞的形态及生长情况；应用流式细胞分选仪检测移植瘤细胞中干细胞（CD44 CD24-/low细胞）比例。用含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和B27细胞培养添加剂的无血清DMEM培养液培养移植瘤细胞，获得细胞微球体；应用流式细胞分选仪检测培养第
【机 构】
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陕西省肿瘤医院内二科，西安 710061西安市妇幼保健院妇科，西安 710002陕西省肿瘤医院微创介入科，西安 710061西安交通大学第一附属医院核医学科，西安 710061
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目的富集裸鼠乳腺癌移植瘤中的乳腺癌干细胞并进行分选。
方法将人乳腺癌MDA-MB-231细胞接种于20只裸鼠右侧腋窝皮下，观察肿瘤的生长情况，30 d后剥离肿瘤，对组织进行HE染色，并从组织中分离出肿瘤细胞。用含血清的DMEM培养液培养分离出的移植瘤细胞，观察移植瘤细胞的形态及生长情况；应用流式细胞分选仪检测移植瘤细胞中干细胞（CD44 CD24-/low细胞）比例。用含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和B27细胞培养添加剂的无血清DMEM培养液培养移植瘤细胞，获得细胞微球体；应用流式细胞分选仪检测培养第10天微球体中干细胞比例，并根据细胞表面标志分选出干细胞。
结果20只裸鼠皮下注入MDA-MB-231细胞9 d后，17只皮下出现肿瘤，肿瘤组织实质细胞多，间质少，瘤细胞呈条索样排列，细胞体积大，胞质丰富，细胞核大小不一，深染，核分裂象多见，核仁清晰，多形性明显。用含血清的DEME培养液培养移植瘤细胞24 h后，细胞开始贴壁，3 d后贴壁率达60%，7 d后细胞增殖加快，细胞形态更趋于一致，多呈梭形，和MDA-MB-231细胞形态无明显差异，其中干细胞比例为（0.10±0.02）%。用含细胞培养添加剂的无血清培养液培养移植瘤细胞后，细胞呈球样生长，第10天微球体中干细胞比例为（70.47±2.03）%。
结论裸鼠皮下接种MDA-MB-231细胞能建立裸鼠乳腺癌异位移植瘤模型，分离出的移植瘤细胞经无血清培养能富集移植瘤中的乳腺癌干细胞，从而能分选出更多乳腺癌干细胞，为研究乳腺癌干细胞生物学特性提供基础。
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