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目的
探讨过表达SNORD47对U87-EGFRvIII胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响。
方法将对数生长期U87-EGFRvIII胶质瘤细胞分为SNORD47组、阴性对照组、空白对照组3组,前2组分别转染携带SNORD47核苷酸序列、阴性对照核苷酸序列的重组慢病毒,空白对照组不作任何处理。48 h后qRT-PCR检测3组细胞SNORD47的表达水平;Western blotting检测3组细胞基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9蛋白的表达;CCK-8实验检测接种后4、24、48、72、96 h 3组细胞的存活率;平板克隆实验检测3组细胞的克隆能力;划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测3组细胞的迁移能力和侵袭能力。
结果qRT-PCR和Western blotting检测显示:与阴性对照组及空白对照组比较,SNORD47组细胞SNORD47表达水平升高,MMP2、MMP9蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);CCK-8和平板克隆实验显示:与阴性对照组及空白对照组比较,SNORD47组细胞接种后48、72、96 h吸光度值降低,SNORD47组细胞克隆数降低,差异均有统计学意义(P<0.05);划痕实验、Transwell侵袭实验显示:与阴性对照组及空白对照组比较,SNORD47组划痕损伤面积增大,穿膜细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论SNORD47能有效抑制U87-EGFRvIII胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力。