【摘 要】
：
目的构建含有人DC-SIGN基因的真核表达载体,并在293T细胞中表达目的蛋白。方法人血培养获得树突状细胞(DC),以DC的mRNA逆转录cDNA为模板,应用PCR体外扩增获得目的 DNA,用限制
【机 构】
：
复旦大学附属中山医院呼吸科,复旦大学附属华东医院呼吸科
论文部分内容阅读
目的构建含有人DC-SIGN基因的真核表达载体,并在293T细胞中表达目的蛋白。方法人血培养获得树突状细胞(DC),以DC的mRNA逆转录cDNA为模板,应用PCR体外扩增获得目的 DNA,用限制性内切酶SalⅠ和BamHⅠ分别酶切VRC4409载体和PCR产物,通过连接、转化及克隆的筛选将目的基因克隆入载体VRC4409,构建载体VRC4409-DC-SIGN,经PCR鉴定及测序分析证实,脂质体介导转染293T细胞,蛋白质印迹分析其表达DC-SIGN蛋白。结果重组质粒经双酶切和测序鉴定证实VRC4409-DC-SIGN构建成功,DC-SIGN蛋白在293T细胞中成功表达。结论成功构建质粒VRC4409-DC-SIGN并在293T细胞中表达目的蛋白,为进一步研究DC-SIGN的生物学功能奠定了基础。
其他文献
目的探讨玻璃化冷冻方法在冷冻保存卵母细胞中的临床应用价值。方法 2015年3月在我中心行卵母细胞玻璃化冷冻1例,于2015年7月行玻璃化解冻,行卵胞浆内单精子注射受精,获得胚
目的探讨卵母细胞玻璃化冷冻技术在体外受精-胚胎移植中的应用价值。方法选取取卵日取精失败进行卵母细胞冷冻的174枚卵母细胞,按冷冻方法分为两组,A组共101枚卵母细胞,行慢
从中国典型培养物保藏中心（CCTCC）引进High Five细胞并对其进行驯化,获得无血清悬浮驯化株（Hi5-SF）。依据《中华人民共和国药典（2010年版三部）》对其进行细胞生物学特性研究、微生
经皮椎间孔镜技术具有手术创伤小、出血少、术后疼痛轻、对脊柱稳定性影响小、术后恢复快等特点,其手术疗效和传统手术相当。随着对应用解剖和手术入路研究的深入,对手术器械
目的探讨生长抑素及凝血酶联合奥美拉唑治疗急性上消化道出血的疗效。方法收集2013年1月至2015年6月我院诊断为急性上消化道出血的患者,按入院顺序分为:40例研究组(接受生长
目的调查宫颈癌患者预后生存情况,找出实际医疗环境中影响宫颈癌预后的多种综合因素。方法对纳入研究的病例进行临床资料的收集和随访。采用COX回归模型分别对临床因素、病理
<正>人文纪录片《我从汉朝来》在央视纪录频道播出后,赢得好评如潮。该片以汉代重要图像史料"汉画像石"为主题线索,讲述了山东武梁祠汉画像、河南南阳汉画像馆、江苏徐州及四
在1 mol.L-1LiPF6碳酸乙烯酯(EC)+碳酸二甲酯(DMC)+碳酸甲乙酯(EMC)(EC、DMC、EMC体积比为1∶1∶1)的电解液中加入添加剂氟代碳酸乙烯酯(FEC),用循环伏安(CV)、恒流充放电、
本文作者设计并研究了直体“特卡切夫”这一单杠创新动作,根据理论研究的成果推导了该动作的最佳振浪下摆条件、最佳脱手、腾起和再握条件,研制最佳值的模拟求解程序。以江苏
<正>教学内容:北师大版教材四年级下册第66页"精打细算"(除数是整数的小数除法)。一课前谈话师:同学们将来想从事的职业真不少,老师极力向你们推荐一个职业:当一名教师!收入