柱前衍生-HPLC法同时测定不同产地茯苓中18种氨基酸含量

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目的:建立柱前衍生-高效液相色谱法测定茯苓中18种氨基酸的含量。方法:以6 mol·L-1盐酸150℃水解1 h,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂衍生后进样分析。采用C18 110A色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温43℃,流动相A为0.1 mol·L-1醋酸钠缓冲液(以醋酸调p H 6.5)-乙腈(93∶7),流动相B为乙腈-水(4∶1),进行梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长254 nm。结果:天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)、苏氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)、赖氨酸(Lys)、胱氨酸(Cys)、色氨酸(Trp)共18种氨基酸质量浓度在5.889119.0μg·m L-1范围内呈良好线性关系(r=0.999 91.000);平均回收率在93.3%106.2%之间,RSD均小于3.0%。各产地均以脯氨酸、蛋氨酸和丝氨酸含量为最高;聚类分析将12个产地分为三类。结论:本方法可用于茯苓药材的质量控制。
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