鼠李糖乳杆菌碱性磷酸酶的提取条件优化及其降解有机磷农药作用

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[背景]我国作为农业大国,对农药的大量使用是不可避免的,但是农药的超范围使用、超标及高检出率对于环境的污染与人体健康的威胁日趋严重。[目的]碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)对有机磷农药具有积极的降解作用,因此,本文将鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus) Z23 (LGG Z23)所产碱性磷酸酶的提取条件进行优化,并研究其对有机磷农药的降解作用。[方法]使用单因素实验和正交实验优化ALP的提取条件;使用对硝基苯酚法测定酶活力;使用分级沉淀和层析法提纯ALP;使用乙酰胆碱酯酶抑制法测定ALP对有机磷农药的降解率。[结果] LGG Z23所产ALP最优提取条件为:细胞破碎时间15 min,破碎功率450 W,料液比(质量体积比)1:6,提取液pH值10.0,此条件下酶活力为[(4.95±0.26) U/mL],比优化前提高2.11倍;对6种有机磷农药的降解率效果为敌敌畏(95.79%±0.01%) >甲基对硫磷(90.69%±0.03%) >毒死蜱(88.90%±0.02%) >敌百虫(86.07%±0.03%) >马拉硫磷(85.31%±0.02%) >乐果(83.18%±0.03%),其中对敌敌畏和甲基对硫磷的降解效果最好,可达90%以上,并且降解作用差异显著(P<0.05)。[结论]本研究为LGG Z23所产ALP的应用研究提供理论依据和实验数据。
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