评价二十二碳六烯酸(DHA)调节人脑血管周细胞(HBVPs)氧糖剥夺-复氧复糖时血管生成素(Ang)表达的机制与Src抑制的蛋白激酶C底物(SSeCKS)的关系。
方法HBVPs以密度2×105个/ml分别接种于96孔板或6孔板，采用随机数字表法分为5组(n＝18)：正常对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD/R组)、DHA组(D组)、SSeCKS基因沉默(S组)、SSeCKS基因沉默＋DHA组(SD组)。氧糖剥夺-复氧复糖损伤模型制备方法：采用无糖-无血清培养液，置于94%N2-5%CO2-1%O2条件下缺氧缺糖24 h，再置于高糖DMEM培养基常氧环境中复氧复糖6 h。D组于缺氧前1 h加入DHA，终浓度40 μmol/L。S组和SD组采用siRNA进行SSeCKS基因沉默，随后SD组于缺氧前1 h加入DHA，终浓度40 μmol/L。于复氧6 h时，采用CCK-8法确定细胞存活率，采用ELISA法检测LDH漏出量，采用Western blot法检测SSeCKS、Ang-1和Ang-2的表达。
结果与C组比较，OGD/R组细胞存活率降低，LDH漏出量增加，SSeCKS和Ang-1表达下调，Ang-2表达上调，Ang-1/Ang-2比值降低，S组SSeCKS表达下调(P<0.05)。与OGD/R组比较，D组细胞存活率升高，LDH漏出量降低，SSeCKS和Ang-1表达上调，Ang-2表达下调，Ang-1/Ang-2比值升高(P<0.05)，SD组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。与D组比较，SD组细胞存活率降低，LDH漏出量升高，SSeCKS和Ang-1表达下调，Ang-2表达上调，Ang-1/Ang-2比值降低(P<0.05)。
结论DHA增加HBVPs氧糖剥夺-复氧复糖时Ang-1/Ang-2比值的机制可能完全与上调SSeCKS表达有关。