Hsp60表达下调通过促进TGFBI分泌增强膀胱癌细胞侵袭转移

来源 :现代泌尿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:scientist89
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目的 探索Hsp60蛋白表达对膀胱癌细胞侵袭转移的影响.方法 免疫组化检测膀胱癌组织芯片Hsp60蛋白的表达,统计学分析其与膀胱癌患者临床参数的相关性;利用慢病毒载体构建H sp60稳定干涉的膀胱癌细胞株,T ransw ell及划痕实验检测Hsp60表达对膀胱癌细胞侵袭转移的影响.RNA-seq分析Hsp60稳定干涉后基因表达的差异,筛选出与侵袭转移相关的基因.Western-bolt及ELISA验证差异基因在蛋白水平的变化,功能学验证差异基因在Hsp60诱导的膀胱癌侵袭转移中的作用,并探索干涉Hsp60表达影响差异基因表达的机制.结果 Hsp60蛋白特异性表达在膀胱癌细胞的胞质中,且在浸润性膀胱癌组织中的表达显著降低.统计学结果显示:H sp60的表达与膀胱癌的转移、临床分级及复发显著相关;细胞学实验证实:干涉Hsp60表达后膀胱癌细胞的侵袭迁移能力显著增强的同时TGFBI的表达及分泌显著升高;利用siRNA阻断Hsp60稳定干涉膀胱癌细胞的TGFBI表达后,可显著抑制Hsp60干涉所造成的膀胱癌细胞侵袭迁移增强.进一步研究发现:Hsp60干涉后膀胱癌细胞线粒体ROS水平及HIF1α的表达均显著升高.利用MitoEMPO降低ROS水平或者利用siRNA阻断HIF1α表达后,Hsp60干涉引起的TGFBI表达及分泌升高可被显著抑制.结论 Hsp60表达降低通过促进TGFBI表达增强膀胱癌细胞的侵袭转移,Hsp60表达降低通过ROS/HIF1α信号通路促进TGFBI的表达.
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