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背景:肠易激综合征（irritable bowle syndrome,IBS）是一种功能性肠道疾病,表现为反复发作的腹痛,与排便相关或伴随排便习惯而改变。IBS全球患病率为7%21%,在我国对普通人群采用同一诊断标准的调查显示IBS患病率为0.82%5.67%。IBS症状常反复发作,除了具有消化道症状,肠外症状如心悸、失眠、头晕、头痛、乏力等都会严重影响患者的生活质量。根据排便习惯可以将IBS分为以下几种亚型,IBS便秘型（irritable bowel syndrome with predominant constipation,IBS-C）,IBS腹泻型（irritablebowel syndrome with predominant diarrhea,IBS-D）,IBS混合型（irritable bowel syndrome with mixed bowel habits,IBS-M）。其中以IBS-D患病率最高。对IBS患者而言,IBS-D相关症状是导致患者进入医疗单位寻求治疗的主要因素。IBS-D主要表现为大便次数增多,大便偏稀。符合Bristol粪便性状量表中的6型、7型。IBS发病机制尚未明确,目前对IBS的研究主要围绕脑-肠互动异常展开。既往对功能性胃肠病（functional gastrointestinal disorders,FGIDS）症状产生的认识以动力异常为主。目前认为导致IBS症状产生主要有以下几方面的内容:内脏高敏,动力因素,肠道菌群改变,肠黏膜免疫失调,中枢神经处理异常等。其中肠道菌群与肠黏膜屏障的特征性改变是目前IBS研究的重点,也是治疗IBS的靶向所在。现代医学治疗的内容主要包括生活方式的调整,微生态/免疫调节剂,针对腹泻,便秘,腹痛的药物治疗,以及抗焦虑抑郁治疗等。传统中医药在治疗本病上积累了大量经验。IBS-D腹痛与腹泻共见,当属于“泄泻”、“腹痛”范畴,其中肝郁脾虚为本病的核心病机。疏肝理脾乃治疗IBS-D的关键所在。现代中医药研究表明,中药复方可以多靶点干预本病,内容包扩改善肠道免疫炎性反应,调节脑-肠互动异常,改善肠道菌群等。目的:探讨IBS-D的发病机制;阐释中药复方痛泻要方加味治疗IBS-D的物质基础和作用机理。方法:本研究采用人体试验,共分为三部分,第一部分为前瞻性队列研究预试验。纳入IBS-D患者共34例,随机分为中药复方组（IBS-d,n=24）,空白对照组（IBS-dCG,n=10）两组。同期招募健康志愿者作为健康对照组（Health,n=30）。对所纳入的受试者登记基本信息,进行病例报告表记录。中药复方组予痛泻要方加味干预四周,空白对照组予一般非药物治疗干预四周。以治疗前后HAD,Wong-Baker积分,中医症状积分为结局指标。为中药复方治疗IBS-D的有效性提供证据支持,同时为后续的大样本临床试验提供样本计算依据。第二部分为肠黏膜免疫屏障研究。共纳入肝郁脾虚型IBS-D患者26例。健康对照组（Health）20例。随机从26例IBS-D患者中选出10名患者进行跟踪随访。采用ELISA法检测健康组和IBS-D患者经中药复方治疗前后的血DAO,D-LA,IL-1β,IL-10,5-HT水平。通过对比不同组别血浆指标的变化情况,探讨IBS-D患者的发病机制,及中药复方对肠黏膜屏障的作用。第三部分为肠道微生物研究。本试验共纳入肝郁脾虚型IBS-D患者30例。随机从30例IBS-D患者中选出20名患者并将之分成2组。一组为中药复方组（n=10）,另一组为空白对照组（n=10）。采用16SrDNA的方法检测收集到的粪便标本,从肠道微生物的角度探讨IBS-D的发病机制,及中药复方的干预靶点。结果:第一部分前瞻性队列研究预实验结果:纳入的30名健康志愿者中,有1例因标本采集不合格予以剔除。其余所有受试者均顺利完成试验。健康对照组与IBS-D患者HAD积分差异具有统计学意义（P<0.05）,其中IBS-D患者HAD评分明显高于健康对照组,表明IBS-D患者普遍存在焦虑抑郁。中药复方组经痛泻要方加味治疗后HAD积分与治疗前相比,不具有统计学意义（P>0.05）;中药复方组治疗前后Wong-Baker积分差异具有统计学意义（P<0.05）,表明中药复方在缓解患者腹痛症状上有明显疗效。治疗前后中医症状积分差异具有显著统计学意义（P<0.01）。其中IBS-D患者腹痛（P<0.05）,便溏不爽（P<0.05）,肠鸣矢气（P<0.05）,腹痛作泻（P<0.05）,腹泻急迫（P<0.05）,小便短赤（P<0.05）,肛门灼热（P<0.05）症状治疗前后缓解程度具有统计学意义。除此之外的其它症状,经中药复方干预后,均有所缓解,但缓解力度不大,尚无统计学意义。中药复方组经治疗后痊愈2例,显效2例,有效18例,无效2例,中药复方组治疗总有效率91.66%。空白对照组,治疗前后中医症状积分差异有统计学意义（P<0.05）。经一般非药物治疗后,痊愈0人,显效0人,有效5人,总有效率为50%。一般非药物治疗可以改善IBS-D患者的症状,但是总体有效率不高,疗效不显著。中药复方组与空白对照组治疗后两组对比,Wong-Baker具有明显差异（P<0.01）,中医症状积分具有明显差异（P<0.01）,HAD评分无明显差异（P>0.05）,以上结果表明:痛泻要方加味治疗IBSD具有良好的疗效。可以显著改善IBS-D患者症状。特别是改善腹痛,便溏不爽,肠鸣矢气,腹痛作泻,腹泻急迫,小便短赤,肛门灼热等症状。但为期四周的中药复方治疗尚不能改善患者焦虑抑郁症状。第二部分肠黏膜屏障试验结果:10例进行中药复方干预的患者中,有1例患者中途退出未完成试验,其余患者均顺利完成,试验过程中无不良反应等事件发生。对比IBS-D患者同健康人群血浆D-LA,DAO,IL-1β,IL-10,5-HT水平发现IBS-D患者血浆IL-1β,5-HT,D-LA,DAO水平均较健康人明显升高（P<0.01）,而IL-10较健康人降低（P<0.01）。用中药复方颗粒剂治疗四周后,发现服药后D-LA,DAO,IL-1β,5-HT均较服药前明显降低（P<0.01）,但仍高于健康人群水平。而IL-10则较服药前明显升高（P<0.01）但仍低于健康人群水平。本部分试验结果表明,中药复方可以通过下调人体的促炎细胞因子、血浆脑肠肽水平,同时上调抑炎细胞因子达到减轻IBS-D患者肠黏膜慢性炎症反应,降低患者肠黏膜通透性,增强其肠黏膜屏障,进而改善IBS-D临床症状的作用。第三部分肠道菌群试验结果:本试验纳入的30例IBS-D患者中有1例患者因粪便标本采集不合格予以剔除。其余受试者均顺利完成试验。采用16SrDNA检测受试者肠道菌群得出:健康组与IBS-D患者菌群结构差异性比较:拟杆菌门、放线菌门为门水平差异性物种（P<0.05）;拟杆菌纲、放线菌纲为纲水平差异性物种（P<0.05）;拟杆菌目、双歧杆菌目、巴斯德氏菌目为目水平显著差异性物种（P<0.05）;消化链球菌科、双歧杆菌科、普雷沃菌科、肠球菌科、巴氏杆菌科为科水平显著差异性物种（P<0.05）;嗜血杆菌属、肠球菌属、帕拉普氏菌属、双歧杆菌属、粪杆菌属为属水平差异性物种（P<0.05）。健康组与IBS-D组Alpha多样性分析无显著差异（P>0.05）。Beta多样性分析表明:两组人群菌群构成具有明显差异性。LefSe分析显示IBS-D患者组LDA score>2的差异物种biomarker有:帕拉普氏菌科、军团菌科、S247、互养菌科,其中拟杆菌门、拟杆菌纲、拟杆菌纲目LDA score>4,是在IBS-D患者中具有显著差异性物种中,影响最为巨大的菌群。在健康组LDA score>2的差异物种biomarker有:肠球菌属、肠球菌科、卟啉单胞菌属、不解糖嗜胨菌属、杆菌目、脱卤杆菌属、脱卤杆菌科、SMB53、丛毛单胞菌科、丛毛单胞菌属、链型杆菌属、杆菌科、放线菌门。其中LDA score>3的差异物种biomarker有消化链球菌科、双歧杆菌属、放线菌纲、双歧杆菌目、双歧杆菌科、粪便杆菌属。其中粪便杆菌属是健康组具有显著差异性物种中影响最大的菌群。IBS-D患者中药治疗前后在不同分类水平上,相对丰度值排在前两位的细菌,依次是硬壁菌门、拟杆菌门,治疗前比治疗后依次为（53.4%vs 48.1%）、（43.2%vs 45.4%）;梭菌纲、拟杆菌纲（52.5%vs 47.0%）、（43.2%vs45.4%）;梭菌目、拟杆菌目（52.5%vs 47.0%）、（43.2%vs 45.4%）;毛螺菌科、拟杆菌科（34.3%vs 25.5%）、（23.8%vs 26.6%）,拟杆菌属、普雷沃菌属（23.8%vs 26.6%）、（18.6%vs17.2%）,经过中药复方干预四周后,拟杆菌门、拟杆菌纲、拟杆菌目、拟杆菌科、拟杆菌属相对丰度值较治疗前有所升高,而硬壁菌门、梭菌纲、梭菌目、毛螺菌科、普雷沃菌属较治疗前相对丰度值有所降低,但尚无统计学意义。IBS-D经中药复方治疗后,肠道菌群结构的变化上,门水平TM7为主要差异性物种（P<0.05）;属水平上杆菌属主要差异性物种（P<0.05）。IBS-D治疗前后Alpha、Beta多样性分析均无显著差异性（P>0.05）。LefSe分析并未找到两组有差异性的物种。对比空白对照组,并未产生完全一致的肠菌改变,表明中药复方痛泻要方加味以肠道内TM7等细菌作为作用靶点,进而影响肠黏膜屏障,达到治疗作用。结论:IBS-D的发病机制同肠黏膜免疫失调,肠道菌群紊乱,神经内分泌失衡相关,以上三个方面的内容共同导致了肠黏膜通透性的增加,而肠黏膜通透性的增加,更容易导致肠内抗原物质接触肠黏膜抗原呈递细胞,从而刺激产生更多的炎性刺激因子,加重肠黏膜免疫屏障的损害。即肠黏膜通透性的增加同肠黏膜免疫屏障的损害互为因果关系,而中药复方痛泻要方加味可减轻患者症状,其产生治疗作用的机制可能与调节肠道免疫,调节肠道微生态,下调肠黏膜通透性相关。