蛹虫草菌诱导柞蚕蛹产生抗菌物质研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guipaeren
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  昆虫在经致病性或非致病性微生物、化学物质、物理方法或创伤等非特异性刺激诱导后,能产生抗菌物质,并且诱导源没有专一性,诱导产生的抗菌物质有着广谱的抗菌活性。本论文研究了蛹虫草菌的培养,蛹虫草的栽培,蛹虫草菌诱导柞蚕蛹产生抗菌物质的粗提取及其活性检测、理化性质及其杀菌机理等有关情况,以便为提纯该种抗菌物质作为新型药物提供基础。研究结果表明:固体培养的菌种呈白色丝状,菌落以辐射状向外衍生,培养后期菌落中心有桔黄色色斑,液体培养三天,孢子呈快速生长情况,此为接种最佳时期。采用注射法将蛹虫草菌种注射于柞蚕蛹体内,栽培蛹虫草所需的温度为22-25℃,光线为散射光,在第一阶段为避光培养,在第二阶段为微弱的散射光,一天保持5-6小时,最后子实体形成时期,光照要达到12小时左右,需要大量水分,适量的空气,整个生长周期为45天左右。用PBS缓冲液粗提蛹虫草菌诱导的柞蚕蛹所产生的抗菌物质,粗提液用抑菌圈法和比浊法检测抑菌活性:雌雄蛹粗提液对金黄色葡萄球菌有抑制作用,对大肠杆菌和枯草杆菌无任何作用;雄蛹第2天产生抗菌物质,雌蛹比雄蛹推迟1天,雄蛹产生抗菌物质抑菌直径较雌蛹大,雌雄蛹产生的抗菌物质一直持续到蛹体死亡;杀菌动力学研究表明雌雄蛹粗提液抑杀金黄色葡萄球菌的时间为半小时。不同pH、冻融次数、温度对柞蚕蛹粗提液理化性质有一定影响:pH为6时抑菌直径最大:冻融多次粗提液仍具有抗菌活性;粗提液800处理10分钟失去抗菌活性。粗提液清除自由基的作用:对超氧阴离子自由基清除率在58.22%左右;对羟基自由基的清除作用很微弱,仅仅达0.32%左右。扫描电镜研究它的杀菌机理,推测可能由于细胞膜破损,造成细胞死亡。  
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