子宫内膜异位症患者间质细胞中MEK与RAS、NF-κB的相关性及对细胞增殖侵袭性的影响

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yujian136
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目的:探讨子宫内膜异位症患者间质细胞中RAS,MEK,NF-κB表达情况及其相关性;分析MEK,NF-κB干预前后子宫内膜间质细胞增殖及侵袭性的变化。方法1.选取2019年3月至2020年10月宁夏医科大学总医院妇科“腹腔镜卵巢囊肿剥除”,术后病理证实为子宫内膜异位症的育龄期妇女患者10例为研究组,同期因其他卵巢良性肿瘤行手术的患者10例作为对照组,术中取得在位内膜组织,分离培养在位内膜间质细胞,通过细胞免疫化学法鉴定间质细胞。2.采用Western-Blot检测RAS、MEK、NF-κB在子宫内膜异位症在位内膜间质细胞及正常内膜间质细胞中的表达,并分析三者的相关性。分别构建MEK,NF-κB siRNA,转染相同10例子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞,设立转染组(MEK siRNA/NF-κB siRNA),si-NC组(无意义链同源siRNA),空白组(等比例转染试剂),采用Western-Blot检测siRNA转染前后RAS、MEK、NF-κB蛋白表达及相关关系。3.采用CCK-8、Transwell检测siRNA转染前后子宫内膜异位症在位内膜间质细胞增殖、侵袭性的变化。结果1.RAS、MEK、NF-κB在子宫内膜异位症在位内膜间质细胞中的表达高于正常子宫内膜间质细胞,且三者呈正相关(rRAS/MEK=0.877,rMEK/NF-κB=0.887,rRAS/NF-κB=0.928,P<0.05);2.MEK siRNA转染子宫内膜异位症在位内膜间质细胞后,MEK、NF-κB的蛋白表达较si-NC组、空白组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),而RAS蛋白表达无明显变化(P>0.05);3.NF-κB siRNA转染子宫内膜异位症在位内膜间质细胞后,NF-κB的蛋白表达较si-NC组、空白组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),而RAS、MEK蛋白表达无明显变化(P>0.05);4.子宫内膜间质细胞转染前后细胞增殖活性的变化:MEK siRNA转染子宫内膜异位症在位内膜间质细胞后,CCK8检测间质细胞增殖性变化,间质细胞增殖性明显降低(P<0.05);NF-κB siRNA转染子宫内膜异位症在位内膜间质细胞后,CCK8检测间质细胞增殖性变化,间质细胞增殖性明显降低(P<0.05)。5.子宫内膜间质细胞转染前后细胞侵袭活性的变化:MEK siRNA转染子宫内膜异位症在位内膜间质细胞后,Transwell检测间质细胞侵袭性变化间质细胞侵袭性明显降低(P<0.05);NF-κB siRNA转染子宫内膜异位症在位内膜间质细胞后,Transwell检测间质细胞侵袭性变化间质细胞侵袭性明显降低(P<0.05)。结论1.RAS,MEK,NF-κB在子宫内膜异位症间质细胞中高表达,且三者呈正相关关系。2.子宫内膜异位症间质细胞中RAS可能通过调节MEK进一步改变NF-κB的表达在内异症间质细胞的增殖侵袭中发挥作用。
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