透明质酸对人羊膜间充质干细胞的增殖效应及机制

来源 :遵义医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiebf1985
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究透明质酸(hyaluronic acid, HA)对人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)增殖的影响并阐明其作用机制。  方法:采用二步两酶消化法分离 hAMSCs;运用流式细胞术和免疫细胞化学染色法鉴定hAMSCs;采用CCK法检测细胞增殖;采用免疫荧光染色法检测蛋白的表达及分布;采用RT-qPCR分析基因的转录水平;采用western blot法检测蛋白的表达。  结果:HA不影响hAMSCs的细胞表面标志物的表达。HA可有效促进hAMSCs增殖,且呈剂量依赖性。在0.6 mg/mL最适剂量下,相对增殖率达到131.9%。在60h范围内,0.6 mg/mL HA呈时间依赖促进hAMSCs增殖,且在36h时,细胞增殖核抗原Ki-67基因的转录水平显著提高。但增殖细胞核抗原PCNA基因及蛋白的表达水平无显著变化。免疫荧光染色结果提示,HA能促进Wnt通路中关键调控因子β-catenin蛋白的表达,并集中分布于细胞核内。western blot实验结果也显示,HA处理使β-catenin蛋白的表达明显上调。RT-qPCR实验结果显示, hAMSCs在HA处理后, Wnt通路相关的40个基因转录水平均有一定程度的变化,但是无论HA处理与否,hAMSCs细胞中均未检测到wnt7a、wnt7b、wnt9b、wnt10b和wnt16等基因。进一步的结果提示,HA能促进Wnt通路中β-catenin、Wnt1、Wnt3a、Wnt8a、cyclin D1、和Ki-67等基因的表达明显上调,其中Wnt3a基因在加药早期上调最为明显。CCK检测结果显示,Wnt通路阻断剂Dkk-1能显著抑制HA的促进hAMSCs增殖的效应。  结论:HA是hAMSCs增殖的促进剂,其可能经由激活Wnt/β-catenin信号通路,促进hAMSCs的增殖。
其他文献
摘 要: 本文就初中英语课堂教学语言科学化运用作探析,旨在阐述运用正确的教学思维模式和策略方法对优化教学过程与方法所起到的推动促进作用。围绕课程教学过程和方法,运用富有情趣的语言,能够在吸引学生学习认知兴趣的基础上,更拓宽其知识视野。教师科学化教学语言运用不仅是课程教学深化和发展的需要,更是提高学生语言学习激情和兴趣的重要保障,有利于增强课程教学效果。  关键词: 初中英语课堂教学 教
目的:吸烟危害健康,它是许多心脏疾病的病因之一。烟碱是烟草的主要成分,它在吸烟诱发心脏疾病方面起主要作用。烟碱可以提高血浆儿茶酚胺的浓度,加快心率,升高动脉血压,引起冠脉痉挛,增加心肌耗氧,提高冠心病的发病率及猝死率。Mehta MC 对狗心的还研究发现,烟碱可引起多种心律失常,其中包括窦性停博、房性心动过速、房扑、房颤、室上性心动过速、Ⅰ-Ⅱ度房室传导阻滞、房室分离、室早二联律、室速、室颤等。多
摘 要: 提问是课堂教学的重要组成部分,而最精湛的教学艺术,遵循的最高准则就是让学生提出问题。只有这样才能让课堂活起来,让学生的创造性思维得到更大的发展。作者注重“问前”和“问中”两个方面的研究,使学生在宽松愉悦的课堂氛围中养成质疑、敢问的习惯,增强创新意识,并逐步形成会问、善问的思维品质。  关键词: 课堂提问 问前 问中  提问是课堂教学的重要组成部分,从教师教的角度看,提问
该实验主要研究1)人不同来源的MSC在诱导条件下能否向成骨细胞分化;2)在分化过程中细胞免疫表型及基因表达的变化;3)GCs在分化过程中所起的作用.在诱导培养的人MSC中,该文检
本文通过对荣华二采区10
血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是体内重要的血管生长因子,促进内皮细胞分裂增殖和新血管的生成。VEGF165是VEGF家族中活性最强的因子,在内皮细胞
本文分析了学习动机论对体育教学的作用,阐述了在体育教学中如何对学生进行学习态度和目的性教育.以及如何从教学方法和教学内容的改革等方面来诱导学生积极主动地学习体育。
广播是20世纪人类最伟大的发明之一。它的诞生,使传播媒介从印刷时代进入到电子   时代,开辟了人类传播史的新纪元。根据信号调制技术的不同,广播可以分为调幅广播和调  
OTDM是光时分复用技术的缩写,该技术应用于激光通信。激光通信是未来高速大容量通信的主要手段之一,世界各国投入了大量研发资金。在光纤激光通信方面,我们已经有较为成熟的
该文以培养的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)吻端细胞系ZC-7901和淡水白鲳(Colossoma brachypomum)吻端细胞系CBS为模型,研究低温胁迫对其细胞膜流动性、钙离子水平、ATP酶、丙